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CRISPR-Cpf1与Cas9效率对比测试试题库及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.CRISPR-Cpf1来源于（）

A.病毒B.细菌C.真菌

2.Cas9蛋白的作用是（）

A.识别靶序列B.切割DNAC.修饰RNA

3.以下哪种不是影响CRISPR-Cpf1效率的因素（）

A.温度B.核酸浓度C.实验地点

4.与Cas9相比，Cpf1切割后产生（）

A.平末端B.5粘性末端C.3粘性末端

5.构建sgRNA载体常用的工具酶是（）

A.限制性内切酶B.DNA连接酶C.二者都用

6.检测基因编辑效率常用的技术是（）

A.WesternblotB.qPCRC.测序

7.以下对Cas9描述正确的是（）

A.只识别特定PAM序列B.不需要引导RNAC.可切割RNA

8.CRISPR-Cpf1发挥作用需要（）

A.tracrRNAB.crRNAC.mRNA

9.提高基因编辑效率的方法不包括（）

A.优化sgRNA设计B.增加Cas蛋白量C.减少细胞培养时间

10.研究CRISPR-Cpf1与Cas9效率对比的意义不包括（）

A.优化基因编辑工具B.降低实验成本C.治疗所有疾病

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.以下属于CRISPR-Cpf1优势的有（）

A.识别不同PAM序列B.切割效率高C.编辑范围广

2.Cas9的特点包括（）

A.应用广泛B.依赖tracrRNA和crRNAC.可进行定点突变

3.影响CRISPR-Cas系统基因编辑效率的因素有（）

A.sgRNA设计B.细胞类型C.递送方式

4.基因编辑实验中常用的细胞系有（）

A.HEK293TB.HeLaC.NIH3T3

5.检测基因编辑效率的方法有（）

A.T7E1酶切B.荧光定量PCRC.全基因组测序

6.构建CRISPR载体需要的元件有（）

A.Cas蛋白编码基因B.sgRNA表达框C.抗性基因

7.以下关于PAM序列说法正确的是（）

A.Cas9和Cpf1的PAM不同B.决定切割位点C.不影响编辑效率

8.优化基因编辑效率可从哪些方面入手（）

A.改进递送载体B.调整实验条件C.更换Cas蛋白

9.CRISPR-Cpf1与Cas9在基因治疗中的应用包括（）

A.纠正致病基因B.调控基因表达C.改变细胞类型

10.基因编辑技术的伦理问题包括（）

A.脱靶效应B.人类生殖系编辑C.生态影响

三、判断题（每题2分，共10题）

1.CRISPR-Cpf1只能用于动物细胞基因编辑。（）

2.Cas9蛋白不需要任何辅助就能识别靶序列。（）

3.不同的sgRNA设计对基因编辑效率影响不大。（）

4.提高Cas蛋白的表达量一定能提高基因编辑效率。（）

5.CRISPR-Cpf1切割DNA后产生的粘性末端有利于连接外源基因。（）

6.基因编辑效率可以通过观察细胞形态变化来准确判断。（）

7.Cas9可以同时编辑多个基因位点。（）

8.优化实验条件不能改善CRISPR-Cpf1的编辑效率。（）

9.研究CRISPR-Cpf1与Cas9效率对比对基因治疗发展无意义。（）

10.只要基因编辑技术能治疗疾病，不需要考虑伦理问题。（）

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述CRISPR-Cpf1与Cas9在PAM序列识别上的差异。

答：Cas9识别的PAM序列通常为NGG等，Cpf1识别的PAM序列与之不同，一般为TTN等，不同的PAM序列决定了它们对不同靶位点的选择。

2.举例说明检测基因编辑效率的一种方法及原理。

答：以T7E1酶切法为例，原理是将编辑后的PCR产物变性再复性，若发生编辑会产生错配双链，T7E1酶能识别并切割错配双链，通过电泳检测切割条带判断编辑效率。

3.简述优化sgRNA设计提高基因编辑效率的原因。

答：优化sgRNA设计可增强其与靶序列的互补配对能力，降低脱靶效应，使Cas蛋白更精准定位到靶位点进行切割，从而提高基因编辑效率。

4.简述基因编