CN112034059A 一种高效液相色谱检测工业大麻花叶及其提取物中大麻素的方法 （滇麻生物科技(曲靖)有限公司）.docxVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利申请

(10)申请公布号CN112034059A

(43)申请公布日2020.12.04

(21)申请号202010853869.6

(22)申请日2020.08.21

(71)申请人滇麻生物科技(曲靖)有限公司

地址655000云南省曲靖市经开区和兴街

东北侧云南博欣生物科技股份有限公

司内6-7C栋

(72)发明人尹升权唐瑛高建慎杨成周张岚燕

(74)专利代理机构曲靖科岚专利代理事务所

(特殊普通合伙)53202代理人戎加富

(51)Int.CI.

GO1N30/02(2006.01)

GO1N30/06(2006.01)

GO1N30/14(2006.01)

权利要求书2页说明书10页附图2页

(54)发明名称

一种高效液相色谱检测工业大麻花叶及其提取物中大麻素的方法

(57)摘要

CN112034059A本发明公开了一种高效液相色谱检测工业大麻花叶及其提取物中大麻素的方法，其特征在于：包括以下步骤：①花叶提取叶的制备：将花叶粉末用第一提取溶剂进行超声提取、离心分离、过滤得到花叶提取液；②提取物样品的制备：将花叶提取液利用第二提取溶剂进行超声提取、过滤得到提取物检测样品；③标准工作溶液的制备：将大麻素标准品用甲醇稀释成标准工作溶液；④高效液相色谱测定：利用高效液相色谱对提取物检测样品和标准工作液进行进样检测，得到标准曲线，之后采用高效液相色谱数据处理软件，按照标准曲线计算出提取物检测样品的大麻素成分含量。本发明具有出峰时间快，检测时间

CN112034059A

修-

修-CBL-22.258

4.C3…3s

1375

112.5

000

750

600

25.0

12.5

0.020.0

28.0

CN112034059A权利要求书1/2页

2

1.一种高效液相色谱检测工业大麻花叶及其提取物中大麻素的方法，其特征在于，包括以下步骤：

①花叶提取叶的制备：先将大麻花叶置于烘箱中进行烘烤，之后将烘烤后的大麻花叶送入粉碎机内粉碎成花叶粉末，然后精确称取花叶粉末置于带磨口的三角烧瓶中，并向烧杯加入第一提取溶剂，第一提取溶剂与花叶粉末的质量比为1:90～100,然后将三角烧瓶密闭、静置后再超声提取，超声提取的过程中向三角烧瓶中加入第一提取溶剂进行补重，提取结束后将提取液放入离心机内进行离心分离，离心分离后精确量取上清液于容量瓶中，并用第一提取溶剂定容至刻度线，最后将定容后的上清液经过有机微孔滤膜进行过滤，过滤得到滤液即花叶提取液；

②提取物样品的制备：将步骤①制得的花叶提取液精确称取后置于带磨口的三角烧瓶中，并准确向三角烧瓶中加入第二提取溶剂，第二提取溶剂与花叶提取液的质量比为0.5:450～500,然后将三角烧瓶密闭、静置后进行超声溶解得到溶解液，超声溶解的过程中向三角烧瓶中加入第二提取溶剂进行补重，之后将补重后的溶解液经过有机微孔滤膜进行过滤，过滤得到的滤液即为提取物检测样品；

③标准工作溶液的制备：将购买得到的大麻素标准品用甲醇稀释成浓度为5～80ug/mL的标准工作溶液；

④高效液相色谱测定：利用高效液相色谱的检验操作标准对步骤②制得的提取物检测样品和步骤③制得的标准工作液进行进样检测，操作方法如下：

a定性分析：先将提取物检测样品和标准工作溶液在高效液相色谱仪上同时进样，在相同保留时间上根据标准工作溶液与提取物检测样品中有无色谱峰来判定提取物检测样品中有无大麻素成分；

b成分含量测定：对标准工作溶液和提取物检测样品进行进样分析，得到峰面积-浓度标准曲线，之后采用高效液相色谱数据处理软件，按照标准曲线计算出提取物检测样品的大麻素成分含量；

高效液相色谱的检测条件为：高效液相色谱为ThermoFisherU3000LC,色谱柱为ZORBAXSB-C18反向色谱柱，流动相为乙腈和水的混合液，乙腈和水的质量比为60～90:10~40,流速为0.8～1.5mL/min,进样量为10uL,柱温箱温度为25～60℃,数据处理软件为Chromeleon7,