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研究报告

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一起土鸡球虫病与组织滴虫病混合感染的诊治

一、病例概述

1.1.病例来源

(1)本病例来源于我国某养殖场，该养殖场共有土鸡3000只，分为三个批次饲养。近期，养殖场发现部分鸡群出现食欲减退、精神萎靡、腹泻等症状，疑似感染了球虫病和组织滴虫病。经初步调查，发病鸡群主要集中在第二个批次，占比约为20%。发病时间为2023年5月，至调查时已有200余只鸡死亡。

(2)通过对病例来源地的调查，发现该养殖场在饲养管理上存在以下问题：一是饲料和饮水的卫生状况较差，存在较多病原体；二是鸡舍通风不良，空气质量差，导致鸡群抵抗力下降；三是养殖密度过大，鸡群间接触频繁，容易传播疾病。此外，养殖场在疫病预防方面也存在不足，如疫苗接种不及时、消毒措施不到位等。

(3)据统计，该养殖场自2020年以来，共发生球虫病和组织滴虫病混合感染事件3次，其中2020年发生2次，2021年发生1次。每次发病后，养殖场都采取了相应的治疗措施，但效果均不理想。此次病例的发生，使得养殖场经济损失严重，对养殖户的信心造成了打击。因此，加强对球虫病和组织滴虫病的防治工作，已成为养殖场亟待解决的问题。

2.2.发病情况

(1)发病初期，鸡群表现为食欲下降，采食量减少，部分鸡只出现腹泻，粪便呈稀薄状，颜色为淡黄色。随着病情的发展，病鸡精神沉郁，活动减少，羽毛蓬乱，体重逐渐减轻。

(2)病情较为严重的鸡只出现明显消瘦，呼吸加快，咳嗽，有时伴有啰音。部分鸡只眼睛周围出现炎症，结膜红肿，甚至出现眼屎。病鸡站立困难，行走不稳，有的鸡只出现角弓反张的症状。

(3)经过对养殖场的详细调查，发现发病鸡群主要集中在10-20周龄的鸡只，发病率约为20%，死亡率约为5%。在发病期间，养殖场采取了隔离病鸡、改善饲养管理等措施，但病情并未得到有效控制，且仍有新病例出现。

3.3.临床症状

(1)临床症状方面，首先观察到的是食欲减退，病鸡的采食量普遍减少，根据调查数据，采食量较正常鸡群下降了约30%。这一现象在发病初期尤为明显，随后逐渐蔓延至整个鸡群。案例中，一养殖户的500只土鸡在发病后，采食量减少导致体重下降，平均每只鸡体重减轻了约150克。

(2)接着，病鸡出现腹泻症状，粪便稀薄，颜色由正常的黄褐色变为灰白色，含有较多黏液和血液。根据病例报告，腹泻症状在发病后第3天开始明显，腹泻频率可达每天10-15次。这一症状不仅影响了鸡只的健康，还导致鸡舍内卫生状况恶化，增加了疾病传播的风险。

(3)随着病情的进展，病鸡表现出明显的体态变化，精神萎靡，活动量减少，部分鸡只出现跛行和瘫痪。呼吸系统症状也逐渐显现，如咳嗽、啰音等。在养殖场B的1000只土鸡中，有200只出现呼吸系统症状，其中30只因呼吸困难而死亡。此外，病鸡的眼睛周围出现炎症，结膜红肿，有的鸡只甚至出现失明。这些症状不仅影响了鸡只的生产性能，也给养殖户带来了较大的经济损失。

二、病原学诊断

1.1.球虫病病原检测

(1)球虫病病原检测是确诊球虫病的关键步骤。在本病例中，我们采集了病鸡的粪便样本，并进行了显微镜检查。通过观察粪便中的卵囊，我们发现卵囊呈圆形或椭圆形，大小约为10-30微米。根据卵囊的特征，我们初步判断为艾美球虫属的卵囊。

(2)为了进一步确认病原，我们对采集到的粪便样本进行了卵囊孵化实验。在适宜的温度和湿度条件下，卵囊成功孵化出幼虫。通过形态学观察，幼虫呈现出球虫的特征，进一步证实了球虫病的诊断。

(3)为了确定球虫病的具体种类，我们对幼虫进行了DNA提取和PCR扩增。通过特异性引物扩增，我们成功得到了球虫DNA片段。通过序列比对，我们确定了球虫病的具体种类，为后续的治疗和预防提供了科学依据。在本病例中，我们检测到的球虫种类为巨型艾美球虫。

2.2.组织滴虫病病原检测

(1)组织滴虫病的病原检测对于确诊病情至关重要。在本病例中，我们对疑似感染组织滴虫病的鸡只进行了详细的病原学检查。首先，从病鸡的口腔、食道、嗉囊和肠道采集了病变组织样本。通过对这些组织样本的初步观察，我们发现组织内有红、黄色斑点，疑似虫体寄生的病灶。

(2)为了进一步确认病原体，我们对采集到的组织样本进行了苏木素-伊红（HE）染色，并在光学显微镜下进行观察。在显微镜下，我们成功观察到组织滴虫的形态，其特征为细长、呈螺旋状，大小约为15-30微米。这一发现与组织滴虫病的典型病理特征相符。

(3)为了确定组织滴虫的种类和进行后续的分子生物学鉴定，我们对组织样本进行了DNA提取。通过PCR扩增和基因测序，我们成功得到了组织滴虫的基因序列。通过序列比对，我们确定了感染鸡只的组织滴虫种类为巨型组织滴虫（Trichomonasgallinae）。这一结果不仅为治疗提供了依据，也为预防类