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研究报告

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一例鸡源mcr-1阳性大肠杆菌感染病例分析及耐药特征研究

一、病例概述

1.病例来源

(1)本病例来源于我国某大型养鸡场，该鸡场主要从事肉鸡养殖，年出栏量达到百万只。近期，该鸡场部分鸡群出现食欲下降、精神萎靡、腹泻等症状，病情较为严重，导致部分鸡只死亡。经过初步的临床诊断，疑似为大肠杆菌感染。

(2)在对病鸡进行病原学检测过程中，从死亡鸡只的肠道内容物中分离出一株阳性菌株。经过实验室鉴定，该菌株为大肠杆菌，并且通过进一步的分子生物学检测，证实该菌株携带mcr-1基因，表明其为mcr-1阳性大肠杆菌。

(3)mcr-1基因是一种编码新型β-内酰胺酶的基因，该酶能够水解几乎所有类型的β-内酰胺类抗生素，使得携带该基因的大肠杆菌对多种常用抗生素产生耐药性。这一发现引起了广泛关注，因为mcr-1基因的存在可能会加剧抗生素耐药性的传播，对公共卫生安全构成严重威胁。因此，本病例的发现不仅对养殖场的管理提出了更高的要求，也对我国抗生素耐药性监测和防控策略的制定具有重要意义。

2.病例临床表现

(1)病例共涉及鸡群2000只，其中感染鸡只1500只，发病率达到75%。病鸡主要表现为食欲减退，采食量下降约20%，精神萎靡，站立不稳，活动量减少。病程初期，部分鸡只出现呼吸道症状，如咳嗽、打喷嚏，随后出现腹泻，粪便呈黄色或水样，有恶臭味。

(2)随着病程的进展，感染鸡只出现不同程度的水肿，尤其在头部、颈部和腹部较为明显。病鸡体重迅速下降，较正常鸡只减少约15%。病鸡死亡率逐渐上升，最高时达10%。通过对病死鸡只进行解剖观察，发现其主要病变为心包炎、肝肿大、脾脏梗死等。

(3)在病例的高发期，感染鸡只的体温普遍升高，平均体温达到42.5℃。实验室检测结果显示，感染鸡只的白细胞总数和淋巴细胞计数显著降低，分别降至正常值的50%和70%。此外，病鸡的免疫球蛋白水平也出现下降，提示其免疫系统受到抑制。通过对病例的流行病学调查和临床表现分析，初步判断此次疫情由mcr-1阳性大肠杆菌感染引起。

3.病例诊断过程

(1)针对此次鸡群疫情，养殖场立即启动了应急预案，并迅速向当地兽医部门报告。兽医部门接到报告后，迅速组织专家团队前往现场进行调查。首先，专家团队对病鸡的临床表现进行了详细的观察和记录，包括食欲、精神状态、呼吸、腹泻等症状。同时，对病死鸡只进行了现场解剖，观察了其内脏器官的病变情况。

随后，从病鸡的肠道内容物中分离出一株疑似大肠杆菌菌株，并进行了初步的生化鉴定。结果显示，该菌株具有典型的革兰氏阴性杆菌形态特征，能够发酵葡萄糖、乳糖等糖类，产生硫化氢，对美蓝试剂呈阳性反应。为进一步确定病原菌，将菌株进行了16SrRNA基因的扩增和测序，结果显示该菌株与大肠杆菌属的基因序列高度相似。

(2)为了进一步验证该菌株是否携带mcr-1基因，专家团队采用实时荧光定量PCR技术对菌株进行了mcr-1基因的检测。检测结果显示，mcr-1基因在菌株中呈阳性表达。为进一步确定mcr-1基因的类型，对阳性菌株的mcr-1基因进行了测序，并与已知的mcr-1基因序列进行比对分析。结果显示，该菌株携带的mcr-1基因与我国已报道的mcr-1型基因高度同源。

此外，专家团队还对分离得到的菌株进行了抗菌药物敏感性测试。结果显示，该菌株对青霉素、头孢菌素、氨苄西林等常用抗生素均表现出耐药性，但对四环素、氟喹诺酮类、氨基糖苷类等抗生素仍保持敏感性。这一结果提示，该菌株可能已经发生了耐药性变异，需要采取相应的防控措施。

(3)基于上述检测结果，结合病例的临床表现和流行病学调查，专家团队初步判定此次疫情由mcr-1阳性大肠杆菌感染引起。为明确诊断，专家团队进一步对病鸡的血液、粪便、环境样品等进行了病原学检测。结果显示，mcr-1阳性大肠杆菌在病鸡群体中广泛存在，且具有一定的传播能力。此外，通过对养殖场环境、饲料、水源等进行了检测，发现存在mcr-1阳性大肠杆菌的污染源。

根据上述诊断结果，专家团队提出了针对性的防控措施，包括对养殖场进行彻底消毒、加强饲养管理、合理使用抗生素等。同时，建议养殖场建立完善的疫情监测体系，定期对鸡群进行病原学检测，以预防和控制mcr-1阳性大肠杆菌的传播。

二、鸡源mcr-1阳性大肠杆菌分离鉴定

1.菌株分离

(1)在本次病例中，养殖场共采集了100份病鸡的肠道内容物样本。样本采集后，立即进行无菌处理，并使用碱性蛋白胨水进行增菌。经过24小时的增菌培养，共观察到50个具有典型大肠杆菌形态特征的菌落生长。这些菌落呈现出灰白色、半透明，边缘整齐，直径约为2-3毫米。

为了进一步分离纯化菌株，将增菌培养后的样品进行划线分离。通过连续划线，最终获得了10个纯化菌株。这些纯化菌株在营养琼脂平板上生长