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研究报告

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一种脱水洋葱制品中微生物菌落总数的检测方法

一、样品前处理

1.1样品采集

(1)样品采集是微生物菌落总数检测的第一步，也是至关重要的环节。在采集脱水洋葱制品样品时，需严格按照国家标准和实验室操作规程进行。样品采集地点应选择在清洁、无污染的环境中，避免样品在采集过程中受到外界污染。例如，我国国家标准GB4789.2-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》规定，样品采集时应在采样容器内加入适量的无菌生理盐水，以防止样品在运输过程中因干燥而影响检测结果。

(2)样品采集方法包括直接采集和间接采集两种。直接采集适用于表面光滑、易于清洁的样品，如包装袋内壁的样品。间接采集适用于表面粗糙、不易清洁的样品，如包装袋外表面、货架等。在采集过程中，应使用无菌工具，如无菌手套、无菌镊子等，避免用手直接接触样品。例如，某实验室在进行脱水洋葱制品样品采集时，针对不同类型的样品，采用了不同的采集方法。对于包装袋内壁的样品，使用无菌镊子直接采集；对于包装袋外表面和货架，则使用无菌棉签进行擦拭，并将擦拭后的棉签放入无菌生理盐水中。

(3)样品采集后，应立即密封并标记，以防止样品在运输过程中受到污染。同时，采集到的样品需在规定的时间内送达实验室进行检测。根据我国相关法规，样品采集后应在2小时内送达实验室，最长不得超过4小时。在运输过程中，应保持样品温度恒定，避免因温度变化而影响检测结果。例如，某实验室在采集脱水洋葱制品样品时，采用冷藏箱进行运输，确保样品在运输过程中温度保持在2-8℃之间。此外，实验室还对样品进行编号，以便在检测过程中进行追踪和管理。

1.2样品预处理

(1)样品预处理是微生物菌落总数检测过程中不可或缺的环节，其目的是确保样品中微生物的完整性，减少样品处理过程中微生物数量的损失或污染。对于脱水洋葱制品，预处理通常包括样品的溶解、均质化以及必要时进行的稀释等步骤。例如，在处理脱水洋葱粉末样品时，首先将样品加入适量的无菌生理盐水中，充分搅拌以确保样品完全溶解。

(2)在样品预处理过程中，溶解是关键步骤之一。样品的溶解效果直接影响后续的均质化和稀释操作。对于固体样品，如脱水洋葱粉末，通常采用无菌生理盐水作为溶剂，以避免使用有机溶剂可能导致的微生物死亡。溶解过程中，需不断搅拌，直至样品完全溶解。在实际操作中，实验室通常会设置一定时间的溶解时间，如30分钟，以确保样品充分溶解。

(3)均质化处理是样品预处理中的另一个重要环节，其目的是将样品中的微生物均匀分布，以获得准确的菌落总数。对于液体样品，可直接使用无菌移液器吸取一定量的样品进行均质化。对于固体样品，则需将溶解后的样品通过无菌滤膜进行过滤，以去除大颗粒物质。均质化处理后，样品需进行适当的稀释，以便在平板计数时能够获得适宜的菌落数。稀释比例的选择应根据样品的预期微生物含量和实验室的标准操作程序来确定。

1.3样品均质化处理

(1)样品均质化处理是微生物检测中的一项关键步骤，其目的是确保样品中的微生物分布均匀，以便于后续的微生物计数。在处理脱水洋葱制品时，均质化处理尤为重要，因为这种制品的微生物分布可能不均匀，直接计数可能会得到不准确的结果。例如，在实验室中，对于脱水洋葱粉末样品，通常会使用均质器进行均质化处理。

(2)均质化处理的方法有多种，包括机械搅拌、超声波处理和均质器处理等。机械搅拌适用于液体样品，可以通过高速搅拌使样品中的微生物均匀分布。超声波处理则是利用超声波的空化效应，将样品中的微生物细胞破碎，从而实现均质化。而均质器处理则是通过机械力将样品分散，适用于固体样品，如脱水洋葱粉末。在实验室操作中，均质器通常配备有不同孔径的筛网，可以根据样品的物理特性选择合适的筛网。

(3)均质化处理的步骤通常包括样品的预处理、均质器的选择和操作以及均质后的样品处理。在预处理阶段，样品可能需要先溶解在一定溶剂中，如无菌生理盐水，然后才能进行均质化处理。均质器操作时，需注意控制处理时间和温度，以避免过度处理导致微生物死亡或损伤。均质后的样品应立即进行稀释，以便于在平板计数时能够得到适宜的菌落数。此外，均质化处理后的样品应迅速转移至无菌容器中，并在规定时间内完成微生物计数，以减少样品在处理过程中微生物数量的变化。

二、培养基准备

2.1培养基的选择

(1)在微生物菌落总数检测中，培养基的选择直接影响着检测结果的准确性和可靠性。合适的培养基应能够支持目标微生物的生长，同时抑制其他杂菌的生长。例如，根据我国国家标准GB4789.2-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》推荐，食品中菌落总数的测定通常使用平板计数法，并选择适合食品样品的培养基，如平板计数琼脂。

(2)对于脱水洋葱制品这类食品，选择