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生物分离与纯化技术模拟试卷及答案

考试时间：______分钟总分：______分姓名：______

一、选择题（每小题2分，共20分。下列每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。）

1.在生物分离过程中，选择分离方法的首要依据通常是：

A.分离物的相对分子质量大小

B.分离物的电荷性质

C.分离操作的成本效益

D.分离设备的专业化程度

2.下列哪种分离方法主要利用物质的分子大小进行分离？

A.离子交换色谱

B.亲和层析

C.凝胶过滤色谱

D.筛分

3.下列关于超滤和微滤的描述，正确的是：

A.超滤截留的分子量范围通常小于微滤

B.微滤主要用于分离细胞和较大的颗粒物

C.两者都主要依赖筛分原理

D.超滤的操作压力通常远高于微滤

4.在离子交换色谱中，为了使带负电荷的蛋白质在阴离子交换柱上被有效吸附，溶液的pH值应：

A.低于蛋白质的等电点

B.高于蛋白质的等电点

C.等于蛋白质的等电点

D.取决于流动相的离子强度

5.亲和层析的核心原理是利用了：

A.物质分子大小对扩散速率的影响

B.分子电荷与固定相电荷的相互作用

C.特异性生物相互作用（如抗原-抗体、酶-底物）

D.溶剂分子与固定相之间的亲和力

6.下列哪种层析技术属于“正相色谱”？

A.使用季铵盐作为固定相的离子交换色谱

B.使用硅胶作为固定相的色谱

C.使用琼脂糖凝胶作为固定相的凝胶过滤色谱

D.使用反相键合硅胶作为固定相的色谱

7.生物大分子（如蛋白质）在分离过程中，保持其生物活性的关键是：

A.尽可能提高分离效率

B.使用高浓度的盐溶液

C.避免极端的pH、温度和有机溶剂

D.采用快速的分离过程

8.透析和超滤都属于膜分离技术，但它们的根本区别在于：

A.使用的膜材料不同

B.跨膜压差的大小

C.是否能选择性地透过小分子物质

D.主要分离的对象（大分子vs小分子/盐）

9.在生物制品的downstreamprocessing中，浓缩通常是指：

A.增大溶质的相对浓度

B.增大溶液的体积

C.去除大部分溶剂

D.降低目标产物的纯度

10.影响色谱分离分辨率的最主要因素是：

A.固定相和流动相的极性

B.分离物的浓度

C.分离柱的长度和直径

D.分离物与固定相之间的相对亲和力差异

二、填空题（每空2分，共20分。）

1.生物分离纯化的目的是将混合物中的________物质与________物质分开，并尽可能提高目标物质的________和________。

2.离心分离是基于物质密度和________的差异，通过离心力场实现分离的技术。

3.在凝胶过滤色谱中，分子量较大的物质在柱中停留时间________，而分子量较小的物质则________。

4.亲和层析中，固定相上的________与目标分离物分子上的________发生特异性结合。

5.调节溶液的________和________是控制蛋白质溶解度的重要方法。

6.分辨率是衡量色谱分离效能的指标，它定义为两个相邻峰保留值之差与峰宽之比的________。

7.膜分离技术中的截留分子量（MWCO）是指膜能够截留________%的分子。

8.生物大分子的变性与复性过程对其后续应用至关重要，通常需要在________的缓冲液中进行。

9.选择合适的________相和________相对于色谱分离的成功至关重要。

10.在分离纯化过程中，除了目标产物，还需要关注杂质的种类和________。

三、名词解释（每小题3分，共15分。）

1.分辨率(Resolution)

2.等电点(IsoelectricPoint)

3.亲和层析(AffinityChromatography)

4.截留分子量(MolecularWeightCutoff,MWCO)

5.下游加工(DownstreamProcessing)

四、简答题（每小题5分，共20分。）

1.简述凝胶过滤色谱（凝胶渗透色谱）的基本原理及其主要应用。

2.比较离子交换色谱和亲和层析在分离纯化蛋白质方面的主要区别。

3.简述膜分离技术在生物