豌豆Pisum sativum L.转化技术综述.pdfVIP

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豌豆（PisumsativumL.）

简・格兰特和保琳・库珀

在本章中，我们描述了一种用于豌豆转化的稳健方法，该方法自1992年以来

在我们的中成功使用。利用从田间或温室种植的植物上收集的未成熟豌豆种

子，我们已经生产了超过30个型的系，包括命名的豌豆品种和高级育

种系。该方法使用未成子叶作为外植体，转化效率在0.2%到13.5%之间，每

个子叶至少产生一条独立转化的植株。Agrobacteriumtumefaciens菌株AGL1和

KYRT1在我们的程序中最成功，卡那霉素、磷霉素和潮霉素是可靠的筛选标记。

已经引入了一些潜在有用的，用于抗虫和抗病性、改善品质特性以及研究代谢

途径，并正在豌豆系中进行研究。

：豌豆；Pisumsativum；转化；未成熟子叶；豆科植物；Agrobacterium

tumefaciens；植物。

1.引言

豌豆（PisumsativumL.）被栽培作为人类食用的食品，以及动物饲料，

且轮作作物的重要组成部分。供人类食用的豌豆——园艺豌豆或蔓生豌

并是

豆——与用于牧草和干豌豆产品的品种不同，后者包括枫叶形、大粒、蓝色

白

和色豌豆。与其他许多豆类一样，豌豆被认为是一种“难以转化”的作物。

而自

然，Puonti‑Kaerlas等人首次豌豆转化以来，现在已经过去了

。1)。此后开发了更有效的方法，这些方法构成了目前使用协议的基

14年(

（见参考文献2）。这些方法使用Agrobacteriumtumefaciens，并在起始

础参

外体型上有所不同，其中未成熟组织最为成功。Schroeder等人(3)使

植类

了成

用未熟胚的纵向切片，Grant等人(4)使用了未成熟子叶，而Bean等

人

：《分子生物学方法》第343卷：Agrobacterium协议，第二版，第一卷编辑：KanWang©

HumanaPressInc.,Totowa,NJ

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Peas(PisumsativumL.)

JanGrantandPaulineCooper

Summary

Inthischapterwedescribearobustmethodfortransformationofpeasthathasbeen

successfullyusedinourlaboratorysince1992.Usingimmaturepeaseedcollectedfrom

field-orgreenhouse-grownnts,wehaveproducedtransgeniclinesforover30geno-

typesincludingnamedpeacultivarsandadvancedbreedinglines.Thismethoduses

immaturecotyledonsastheexnt,andthetransformationefficiencyisintherange

0.2to13.5%ofcotyledonsproducingatleastonetlytransformedline.

AgrobacteriumtumefaciensstrainsAGL1andKYRT1