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选修一微生物的实验室培养详解演示文稿第1页，共36页。优选选修一微生物的实验室培养第2页，共36页。微生物的类群原生生物：原核生物:真菌:病毒:如酵母菌如草履虫、单细胞藻类等无细胞结构真核细胞细菌、蓝藻原核细胞？第3页，共36页。第4页，共36页。一、培养基1.概念：人们按照微生物对_________的不同需求，配置出供其____________的营养基质。营养物质生长繁殖2.培养基的类型和用途按物理性质固体培养基:加琼脂；用于分离、鉴定、计数液体培养基：不加凝固剂；用于工业生产。半固体培养基：加少量琼脂；可用于保藏菌种。第5页，共36页。按化学成分合成培养基：成分明确；分类鉴定。天然培养基：成分不明确；用于工业生产。按目的用途分鉴别培养基：培养基中加入某种试剂或化学药品，区别出不同类型的微生物。选择培养基：根据某一种或一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性设计培养基。如用青霉素选出酵母菌等。第6页，共36页。选择培养基选择培养基应用加入青霉素分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐分离金黄色葡萄球菌不加氮源分离固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基分离自养型微生物加入青霉素等抗生素分离导入了目的基因的受体细胞在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其它种类微生物生长的培养基。第7页，共36页。鉴别培养基根据微生物的代谢特点在培养基加入某种指示剂或化学药品配制而成，用以鉴别不同的微生物只起鉴别作用，并不能抑制其他微生物第8页，共36页。固体培养基液体培养基第9页，共36页。培养基一般都含有哪些营养物质，此外还要满足哪些要求？第10页，共36页。不管哪种培养基，一般都含有水、碳源、和氮源、无机盐等营养物质另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。第11页，共36页。一.培养基：微生物生存的环境和营养物质1.基本成分：碳源、氮源、水、无机盐⑴碳源无机碳源：有机碳源：CO2、CO32-、HCO3-牛肉膏、蛋白胨等自养微生物异养微生物⑵氮源无机氮源：有机氮源：NH4＋、NO3-牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等注：对于异养微生物，含C、N的化合物既为碳源，也是氮源。第12页，共36页。牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方H2O定容至1000mlNacl5g蛋白胨10g牛肉膏5g琼脂20.0g第13页，共36页。培养基配制原则⑴目的明确：⑵营养全面、浓度适宜、比例恰当⑶适宜的pH值：有机碳源异养型：根据微生物的种类、培养目的选择原料自养型：不加碳源加入缓冲剂（CO2碳源）生产科研第14页，共36页。2.无菌范围：实验操作空间消毒操作者的手、衣着消毒实验用具灭菌实验操作过程二.无菌技术：防止外来杂菌的污染1.消毒与灭菌：酒精灯旁操作超净工作台第15页，共36页。二、无菌操作技术1.获得纯净培养物的关键？防止外来杂菌入侵2、无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？避免操作者自身被微生物感染第16页，共36页。消毒与灭菌消毒：使用较温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。灭菌：使用强烈的理化因素杀死物体内所有的微生物，包括芽孢和孢子。灭菌与消毒技术是微生物有关工作中最普通也是最重要的技术。第17页，共36页。芽孢有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，对恶劣的环境有很强的抵抗力。每一细胞仅形成一个芽孢，所以其没有繁殖功能。细菌、原生动物、真菌和植物等产生的一种有繁殖或休眠作用的生殖细胞。能直接发育成新个体。孢子——特殊的休眠构造第18页，共36页。消毒的方法：1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min2、巴氏消毒法：70-75℃下煮30min或80℃下煮15min3、化学药剂消毒法:用75%酒精进行皮肤消毒;氯气消毒水源4、紫外线适用对象：操作空间、液体、双手等第19页，共36页。灭菌的方法：1、灼烧灭菌2、干热灭菌：160-170℃下加热1-2h。3、