2026届高三生物二轮复习课件：专题八　专题强化练　PCR技术及应用.pptxVIP

第一部分专题八专题强化练;答案;;;一、选择题(每小题只有一个选项符合题目要求。)

1.为了培育出抗病毒的优良玉米，研究人员利用基因工程技术进行了相关实验，其中抗病毒基因、P载体及相关限制酶的切割位点如图所示。已知P载体上含有绿色荧光蛋白基因(GFP)和抗性基因Kanr/Neor，一般情况下，抗性基因Kanr/Neor在真核细胞中表达时，细胞具有新霉素抗性；在原核细胞中表达时，细胞具有卡那霉素抗性。下列叙述错误的是;A.据图分析，利用PCR技术扩增抗病毒

基因时，应选择的引物是引物1和引

物4

B.将抗病毒基因与P载体构建成重组质

粒时，可选择限制酶HindⅢ和EcoRⅠ

C.构建的基因表达载体中，目的基因转

录时的模板链是A链

D.在筛选转化成功的玉米细胞时，应

在培养基中添加新霉素;答案;答案;已知形成的双链DNA区遵循碱基互补配对原则，且在本实验的温度条件下不能产生小于9个连续碱基对的双链DNA区。能得到带有荧光标记的DNA探针的反应管有

A.①② B.②③ C.①④ D.③④;答案;答案;②和④试管加的都是1种单链DNA，试管中存在两种可能：一是这条单链的3′端回折与自身一部分碱基配对，从而作为引物和

模板，;对于②试管，配对后：;3.(2025·滨州二模)应用农杆菌转化法时，目的基因插入T－DNA后，需要对T－DNA测序。测序前根据目的基因的序列设计引物对T－DNA进行PCR扩增的过程如图所示。下列叙述正确的是

A.实验需要清楚目的基因的全部碱基序列

B.L、R酶切位点需要在T－DNA外侧，且需用同

种限制酶切割

C.引物设计时需要考虑目的基因两侧序列，选择

引物b、c

D.1个环状DNA分子首次PCR后得到的DNA分子

含有两个游离的磷酸基团;实验只需要清楚目的基因两侧的碱基序列，以便设计引物，A错误；

L、R酶切位点需要在T－DNA内侧，且需用同种限制酶切割，B错误；

引物设计时需要考虑目的基因两侧序列，应选择引物a、d，C错误；

1个环状DNA分子首次PCR后得到的DNA分子为链状，含有两个游离的磷酸基团，D正确。;4.(2025·济宁模拟)巨噬细胞表面的CD23识别到白色念珠菌(一种真菌)后，其细胞内的一氧化氮???酶会被激活，产生一氧化氮，从而杀灭真菌。研究人员用白色念珠菌感染野生型小鼠和JNK(一种蛋白激酶)基因敲除小鼠，采集了感染前后两种小鼠血细胞中的mRNA，利用RT－PCR技术扩增CD23基因，过程和结果如图所示。下列叙述错误的是;A.巨噬细胞、树突状细胞、B细胞都是具有摄取、处理、呈递抗原能力

的免疫细胞

B.过程Ⅱ中对1个单链cDNA进行20次循环，理论上需要消耗219个引物b

C.未感染时，野生型小鼠和JNK基因敲除小鼠CD23基因的数量可能相同

D.临床中可以使用JNK蛋白激酶活性剂治疗白色念珠菌引起的感染;巨噬细胞、树突状细胞、B细胞都属于抗原呈递细胞，具有摄取、处理、呈递抗原能力，A正确；

过程Ⅱ拟对单链cDNA进行20次循环的扩增，形成的DNA分子数是220－1个，每个DNA分子带一个引物b，根据DNA半保留复制特点，该过程理论上至少需要219个引物b，B正确；;分析题图可知，未感染时，野生型小鼠和JNK基因敲除小鼠CD23基因PCR的Ct值一致，因此它们的CD23基因数量可能相同，C正确；

结合题图可知，感染时，JNK基因敲除组RT－PCR的Ct值低于野生型，说明JNK基因会抑制CD23基因的表达，故使用JNK蛋白激酶抑制剂可治疗白色念珠菌感染，D错误。;5.(2025·广东，7)Solexa测序是一种将PCR与荧光检测相结合的高通量测序技术。为了确保该PCR过程中，DNA聚合酶催化一个脱氧核苷酸单位完成聚合反应后，DNA链不继续延伸，应保护底物中脱氧核糖结构上的

A.1′-碱基 B.2′-氢

C.3′-羟基 D.5′-磷酸基团;6.(2024·黑吉辽，7)关于采用琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物的实验，下列叙述正确的是

A.琼脂糖凝胶浓度的选择需考虑待分离DNA片段的大小

B.凝胶载样缓冲液中指示剂的作用是指示DNA分子的具体位置

C.在同一电场作用下，DNA片段越长，向负极迁移速率越快

D.琼脂糖凝胶中的DNA分子可在紫光灯下被检测出来;在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关，需根据待分离DNA片段的大小配制琼脂糖溶液，故琼脂糖凝胶浓度的选择需要考虑待分离DNA片段的大小，A正确；

凝胶载样缓冲液指示剂通常是一种颜色较深的染料，可以作为电泳进度的指