DB13∕T 6195-2025 小麦一年多代、分子标记辅助育种技术规程.docxVIP

ICS65.020.20CCSB05

13

河北省地方标准

DB13/T6195—2025

小麦一年多代、分子标记辅助育种

技术规程

2025-12-16发布2026-01-16实施

河北省市场监督管理局发布

DB13/T6195—2025

I

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由河北省农业农村厅提出。

本文件起草单位：河北省农林科学院生物技术与食品科学研究所、河北省种子总站等。

本文件主要起草人：董福双、刘志芳、焦博、杨阳、郑文永、孙雷、马晓丽、周硕、王娇、马春红、赵璞、朱彦辉。

DB13/T6195—2025

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小麦一年多代、分子标记辅助育种

技术规程

1范围

本文件规定了小麦一年多代、分子标记辅助育种技术的前期准备、育种方案、幼胚培养、分子标记辅助育种、分子标记田间辅助选育等技术要求。

本文件适用于小麦一年多代、分子标记辅助育种。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB4404.1-2008粮食作物种子第1部分：禾谷类

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4符号、代号、缩略语

本文件所涉及的主要符号、代号、缩略语的全称及中文释义如下：

ddH2Odoubledistilledwater双蒸水

MASMark-assitedselection分子标记辅助选择

SDSSodiumdodecylsulfate十二烷基硫酸钠

DNADeoxyriboNucleicAcid脱氧核糖核酸

PCRPolymeraseChainReaction聚合酶链式反应

5前期准备

5.1仪器

5.1.1DNA提取仪器

核酸提取磨样机、水浴锅、移液器（1ml、100ul、10ul）、涡旋仪、低温高速离心机（最高转速10000rpm）和通风橱等。

5.1.2PCR检测仪器

PCR仪、电泳槽及凝胶成像系统。

5.2小麦种植所需设施

5.2.1主要设施设备

光温可控温室。可控温度15℃~35℃；光通量密度60μmol/m2·s～100μmol/m2·s，采光或光照时间≥14h。

人工气候箱。可控温度6℃~25℃,光通量密度.60μmol/m2·s～100μmol/m2·s。

栽培盆规格。直径25cm、高21cm。

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育种田。土壤类型为壤土，具有良好的肥力，pH值6.0～7.5，排水良好，无盐碱化现象；育种田应与其他小麦田保持25m以上间隔距离。

5.3生产资料

育苗基质、穴盘、穴盘托等，复合肥、磷酸二氢钾等常用肥料，百菌清、吡虫啉、菊酯类等抑菌防虫药物。

6育种方案

6.1分子标记的筛选及亲本确定

根据育种目标，利用公共数据库（如：）或文献获得目标基因标记信息及供体亲本，并对这些标记的可靠性进行验证。

6.2亲本选择

6.2.1受体亲本宜选择适合当地自然和栽培条件的品种及品系，系谱及遗传背景明确，综合农艺性状优良，且具有较好的配合力。

6.2.2供体亲本宜选择系谱及遗传背景明确，综合农艺性状良好，含有与受体亲本目标性状互补的质量或主效基因。

6.3育种途径

6.3.1单个基因转育

室内单交(A/B)再连续回交3～4次(BCn)，然后自交2次，BCnF3代以后世代分子标记辅助田间选择。

6.3.2多个基因聚合

2个基因聚合

亲本各含1个目标基因，室内单交(A/B)后自交2次，F3代以后分子标记辅助田间选择。

6.3.3个基因聚合

每个亲本各含1个目标基因，采用复交的方式。1个亲本分别与另外两亲本杂交，杂交F0再杂交(A/B//A/C)，然后自交2次，F3代以后世代分子标记辅助田间选择。

7幼胚培养

7.1幼穗选取

取授粉后15d左右的小麦幼穗，选取麦穗中部的6个小穗，去除包被的颖壳备用。

7.2幼粒消毒

在超净工作台中，用1.5%的次氯酸钠进行表面消毒10min～15min，再用灭菌ddH2O冲