酵母双杂交操作步骤.pdfVIP

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  • 2026-03-10 发布于河北
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(酵母菌储存在-7r(c中,引物和质粒DNA储存在-2CTC中)

概念:

1.次序转化:指的是先将一种质粒转化进酵母中常(是DNA-BD/baitplasmid),在

选择培育基中选择出阳性克隆,之后再将此一个质粒(ADfusionlibrary)转化进去。

优点:就是比共转化使用更少的质粒DNA,也就是节省质粒DNAe

2.共同转化:将两种质粒一起转化进酵母中。优点:比次序转化更简单操作。

pGBKT7•一的选择物是:kanamycin(卡那霉素)?

PGADT7■…的选择物是:ampicillin(节西林)?

各种SD培育基:

1)SD/-ae(腺噤吟)/-leu(亮酸)/-trp(色酸)/-his(组酸)(1000ml)

(?四缺”)

酵母氮源Y(NB):6.7g;

-ade/-leu/-trp/-hisDOsupplement.6g(购买来就配好的);

葡萄糖2g

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