肿瘤型丙酮酸激酶的原核表达优化及高特异性抗体的制备与应用探索.docxVIP

肿瘤型丙酮酸激酶的原核表达优化及高特异性抗体的制备与应用探索

一、引言

1.1研究背景与意义

癌症严重威胁人类健康和生命，中国每年癌症发病人数众多且呈上升趋势，正逐渐成为首位死亡原因。癌症的诊断与治疗问题成为研究热点，但目前对恶性肿瘤的早期发现、诊断以及病情进展监测，尚缺乏理想的肿瘤标志物。肿瘤型丙酮酸激酶（TumorM2pyruvatekinase，TUM2-PK）作为近年来发现的一种肿瘤标志物，在癌症诊断、动态监测、抗癌疗效评价及预后判断中展现出广泛的应用价值，引起了众多科研工作者的关注。

丙酮酸激酶（PK）是糖酵解途径中的关键酶，有4种同工酶，呈现组织特异性，分别为L型、R型、M1型和M2型，正常情况下多以活性四聚体形式存在。其中，L型主要存在于肝脏和正常肾脏的近曲小管；R型存在于红细胞；M1型主要存在于骨骼肌、心脏和脑；M2型主要表达于肺、正常肾脏的远曲小管、胚胎以及未分化或增生的组织。研究表明，当恶性肿瘤发生时，PK的组织特异性同工酶（如L型、R型、M1型PK等）表达减少，在癌基因编码的激酶作用下，M2-PK在肿瘤细胞中过度表达，且其Ser和Tyr位点发生磷酸化，致使原本具有高活性的四聚体解离为无活性的二聚体形式，即TUM2-PK。

TUM2-PK与底物磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）的亲和力很低，