PGT-M诊断指南 (课件).ppt

分子诊断技术平台08PCR技术应用方案巢式PCR通过两轮扩增降低非特异性产物干扰，尤其适用于低模板量样本（如胚胎活检细胞），增强稀有突变检出率，但需严格防控污染风险。多重PCR针对多外显子基因或家系多位点检测，设计多组引物同步扩增，结合毛细管电泳或荧光标记技术，提高检测通量和效率，如囊性纤维化CFTR基因的复合杂合突变分析。靶向扩增采用特异性引物对目标基因片段进行扩增，通过优化退火温度（50-65℃）和循环次数（30-40轮），确保突变位点的精准检测，适用于已知单基因病的点突变筛查。作为金标准用于验证已知突变或小片段测序（1kb），准确性高达99.9%，但通量低且成本高，适合