端粒长度检测规范.ppt

TRAP法细胞处理规范08细胞培养与收集标准流程无菌操作要求全程在生物安全柜中进行操作，使用预冷的PBS冲洗细胞2-3次以彻底清除培养基残留，避免血清蛋白干扰后续裂解步骤。低温离心条件收集细胞后需在4℃环境下以3,000×g离心5分钟，离心力不足会导致细胞沉淀不充分，过高则可能破坏细胞结构影响后续裂解效率。细胞密度控制培养细胞至对数生长期（70-80%汇合度），过高密度可能导致端粒酶活性下降，需使用胰酶消化时严格控制时间避免过度消化损伤细胞膜完整性。10mMTris-HCl(pH8.0)维持等渗环境，1%NP-40破坏细胞膜结构，150mMNaCl保持离子强度，5