项目6-1-3 细菌的特殊染色及放线菌形态观察.pptxVIP

技能训练三细菌的特殊染色及放线菌

形态观察;一、实验目的

1.能够对芽孢、荚膜、鞭毛进行染色,并能观察到芽孢、荚膜、鞭毛。

2.掌握培养放线菌的方法，能够观察到放线菌的菌丝和孢子。

;二、实训材料和用具;（一）芽孢染色原理

细菌芽孢具有壁厚、通透性差、不易着色等特点，所以普通染色法只能使细胞着色，而芽孢显示不着色的透明体。芽孢染色法是采用着色力强或高浓度的染料，进行加温处理并延长染色时间，使菌体与芽孢均染上颜色，芽孢一旦着色就难以脱色，通过脱色剂除去菌体颜色而保留芽孢的颜色，然后再用复染剂复染菌体，使菌体与芽孢呈现不同的颜色，以便于观察。;;四、训练操作规程;方法二：

（1）取菌：取试管１支，加蒸馏水7～8滴，取菌种制成浓菌悬液。

（2）初染：于管中滴加苯酚复红液，用木夹夹好，于灯焰上加热近沸，维持３~４min。

（3）涂片：取加热后的菌悬液2～3环制成涂片，风干，加热固定，冷却。

（4）脱色：于涂片上滴加乙醇丙酮液１~２滴,进行脱色３０s。

（5）复染：用５％的孔雀绿复染２~５min，水洗，晾干。

（6）镜检：制片干燥后用油镜观察，芽孢呈红色，菌体呈绿色。

;;2.荚膜染色法;方法二：

（1）涂片：先加１滴墨水于洁净的玻片上，并挑少量褐球固氮菌与之充分混合均匀。

（2）加盖玻片：放一清洁盖玻片于混合液上，然后在盖玻片上放一张滤纸，向下轻压，吸收多余的菌液。

（3）