RNase H大肠杆菌用户手册v2.0：RNA DNA杂交分子RNA链降解.pdfVIP

分子克隆

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用手

版本2.0

产品名称：RNaseH，大肠杆菌

货号：RNHE‑100，RNHE‑200，RNHE‑OEM，B‑RH10

描述：

RNaseH（rnh，大肠杆菌）是一种内切核糖酶，可以降解RNA/杂交分子中的RNA链。RNaseH消

化产生的核糖核苷酸分子具有5’‑磷酸和3’‑羟基末端。RNaseH对单链或双链RNA分子几乎不活跃。

协议：

第二条c链合成协议

根据特定逆转录酶的建议，进行第一条c链合成反应。

将以下成分（在冰上）加入XXμl的第一条c链合成反应混合物中：10XDNA聚

合酶I反应缓冲液4μlRNaseH0.2μl（1U）DNA聚合酶I1.5μl（30U）总体积

至50μl

轻轻涡旋并短暂离心。在15°C下孵育2小时。不要让温度升至15°C以上。加

入2.5μl（12.5U）的T4DNA聚合酶，在15°C下孵育5分钟。通过加入5

μl的0.5MEDTA（pH8.0）终止反cDNA可用于进一步的克隆相关操

作。