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pcr上岗证考试试题及答案

单项选择题

1.聚合酶链式反应（PCR）扩增靶DNA序列的核心原理不包括以下哪项

A.DNA的半保留复制特性

B.高温变性解开双链DNA

C.低温退火引物与模板特异性结合

D.限制性内切酶切割产生粘性末端

E.中温延伸合成新生靶序列

答案：D

解析：PCR技术的核心原理基于DNA的半保留复制，通过变性（95℃左右高温解开双链模板DNA）、退火（50-60℃降温使引物与模板互补序列特异性结合）、延伸（72℃左右DNA聚合酶催化合成新生DNA链）三个步骤的循环重复，使靶DNA序列得到指数级扩增。限制性核酸内切酶的作用是识别特定序列切割DNA，是分子克隆、RFLP等技术的核心工具，不属于PCR扩增的基本原理，因此D选项错误。

2.根据我国《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》及现行检验规范，开展闭管检测的实时荧光定量PCR技术，临床PCR实验室最少应设置几个独立的工作区域

A.2个

B.3个

C.4个

D.5个

E.6个

答案：B

解析：我国规范要求，临床PCR实验室应当根据检测技术的特点设置物理独立的工作区域，对于开放式PCR产物检测（如常规PCR后凝胶电泳分析），需要设置试剂准备区、标本制备区、扩增区、扩增产物分析区4个独立区域。对于采用闭管检测、不需要开盖分析产物的实时荧光定量PCR技术，可将扩增区与扩增产物分析区合并，因此最