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基因工程的基本操作程序

一、目的基因的筛选与获取

利用PCR（聚合酶链式反应）获取和扩增目的基因

1.PCR扩增不同目的基因时，两个反应体系中不同的组分有_____________________

2.添加的缓冲液的作用：______________________________________________________

3.引物的作用：_______________________________________________________________

4.引物的选择：____________________，需在引物的_____（5’端或3’端）添加合适的限制

酶序列

5.为使目的基因正确连接（如图2）引物1和引物2分别应添加的限制酶为_______________，

用PCR技术检验目的基因是否正确连接，应选用的引物组合为_______________。

6.为使目的基因与载体正确连接，使用PCR技术在目的基因两端加上限制酶识别序列，扩

增目的基因时应选用的引物组合是_____________

引物1：5’-AAGCTTTCTGTT-3’

引物2：5’-AAGCTTCTTGAT-3’

引物3：5’-GAATTCCTTGGA-3’

引物4：5’-GAAT