高考生物复习PCR技术的原理及其应用.pptxVIP

;活动：利用聚合酶链式反应(PCR)扩增DNA片段并完成电泳鉴定，或运用软件进行虚拟PCR实验。;考情分析;一、PCR技术的原理;(一)PCR技术“引物”归纳分析

1.引物的设计

典例1PCR扩增Bt抗虫蛋白基因时，复性温度的设定是成败的关键。复性温度过高会抑制引物与模板的碱基配对，复性温度过低会增大引物与DNA模板链发生错配的概率。复性温度的设定与引物长度、碱基组成有关。

(1)PCR扩增Bt抗虫蛋白基因时，设计引物的依据是_________________

，引物与Bt抗虫蛋白基因模板链的端的部分序列互补配对。;(2)复性温度越低，产物特异性越，扩增效率越。

(3)引物长度越短，产物特异性越。

(4)引物的长度相同时，GC含量越高，需要设定的复性温度越。;(5)某同学设计两组引物(只标注部分碱基序列)都不合理。请解释原因：;;2.引物的修饰

典例2引物用PCR技术将DNA分子中的A1片段进行扩增，设计了引物Ⅰ、Ⅱ，其连接部位如图所示，X为某限制酶识别序列。扩增后得到的绝大部分DNA片段是图中的;在第一次PCR循环结束后，得到以引物Ⅱ延长产生的单链，在以后的PCR循环中，以引物Ⅱ所形成的单链为模板在引物Ⅰ的作用下合成