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细菌质粒的接合转移

——三亲本杂交

实验原理：1、质粒的转移性

细菌的遗传重组有接合转移、转化和转导三种主要方式。

接合转移是指供体和受体细胞间直接接触，质粒DNA从供体向受体转移的过程。

质粒可分为可转移质粒和非转移质粒两类，转移质粒带有完整的编码转移酶的tra基因,质粒能自主地从一个细胞转移到另一个细胞,甚至还能带动供体细胞的染色体DNA向受体细胞转移，这类质粒常被称为自主转移质粒。如大肠杆菌的F质粒。

有些质粒不含tra基因,但含有质粒转移起始位点oriT，虽不能自主转移，但能被其他一些含完整tra基因的质粒所诱动,这类质粒又被叫做可诱动质粒。

实验原理：2、本实验所用供体质粒

本实验中要转移的质粒是pHN102，它是在广宿主范围的稳定载体pTR102中插入生物发光酶基因luxAB构建而成。

pTR102中带有含par基因的稳定性片段（stabillty）,它能在较多革兰氏阴性细菌中稳定存在，它含有质粒转移起始位点oriT，不含完整的转移基因tra，必须在含有tra基因的辅助菌株诱动下，pTR102才能从供体菌向受体菌转移。

为有效筛选转移接合子

(transconjugant),pHN102

质粒上带有Tc抗性和生物

发光酶基因(luxAB）两