小鼠骨髓染色体制备与观察课件.pptVIP

李孝敬

基础医学楼A412生科院办公室

电话18三体综合征;人骨髓染色体抽取;怎样才能制备一个好的染色体标本？

获得大量处于有丝分裂中期的细胞。

使细胞膜破裂，且染色体能够完整并较分散的释放出来。;秋水仙素处理：秋水仙素溶液可抑制纺锤体的形成，使正在分裂的骨髓细胞停止在细胞分裂中期，积累大量中期分裂相细胞。

低渗作用:使细胞充分膨胀，减少染色体间的相互缠绕和重叠。

预固定：终止低渗作用，使细胞离心时不易破裂，固定维持细胞形态结构。

高距离滴片：使细胞膜易于破裂，获得中期染色体标本，在显微镜下观察染色体的结构和数量。;四、实验步骤;颈椎脱臼法处死小鼠;低渗不足，则细胞膨胀不够，滴片时细胞不破裂。

低渗过度，则细胞提前破裂，染色体观察不全。

空气吹打法：用吸管橡胶头内的空气混匀液体。;5.固定、制细胞悬液：加固定液5ml吹打混匀

固定15min离心1500r/min，5min

弃上清，加固定液0.2~0.4ml

吹打成细胞悬液，准备制片使用。;小鼠骨髓染色体10×10;小鼠骨髓染色体10×40;;数目观察：小