3D细胞球培养超低吸附板移液防扰流安全操作规范.docVIP

3D细胞球培养超低吸附板移液防扰流安全操作规范

一、操作前准备

（一）环境与设备校验

超净工作台状态确认操作前30分钟开启超净工作台的紫外灯进行灭菌处理，灭菌结束后关闭紫外灯并开启风机通风至少15分钟。使用空气尘埃粒子计数器对工作台内的空气洁净度进行检测，确保百级洁净度标准（每立方英尺空气中≥0.5μm的粒子数不超过100个）。同时，检查工作台内的酒精灯、镊子、移液器等工具是否摆放整齐，避免操作过程中因物品杂乱导致碰撞或污染。

移液器校准与维护使用移液器校准仪对所需量程的移液器进行校准，校准范围涵盖常用的移液体积，如10μL、50μL、100μL、200μL、1000μL等，确保移液误差在±1%以内。检查移液器的吸头连接是否紧密，活塞是否顺畅，若发现活塞卡顿或吸头松动等问题，应及时进行维修或更换。此外，移液器需定期进行清洁和消毒，可使用75%的乙醇溶液擦拭移液器表面，对于污染较严重的部位，可拆卸后进行浸泡消毒。

超低吸附板预处理从包装中取出超低吸附板后，需在超净工作台内放置至少30分钟，使其温度与室温平衡，避免因温度差异导致细胞培养体系产生对流。同时，检查超低吸附板的外观是否完好，有无裂缝、变形或污渍等情况，若发现损坏应立即更换。对于新购买的超低吸附板，可使用无菌的PBS溶液进行冲洗，去除板表面可能残留的杂质或化学物质，冲洗后用无菌吸头吸干板内的PBS溶液。

（二）试剂与材料准备