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犬干扰素-γ复性与活性测定的关键技术与影响因素研究

一、引言

1.1研究背景

犬干扰素-γ（Canineinterferon-γ，C-IFN-γ）作为一种关键的细胞因子，在犬的免疫防御体系中扮演着举足轻重的角色。它不仅具备强大的抗病毒能力，能够有效抑制病毒的复制与传播，还在抗肿瘤和免疫调节等方面发挥着重要作用。在犬感染病毒性疾病时，C-IFN-γ能够迅速激活机体的免疫细胞，增强其抗病毒活性，从而帮助犬抵御病毒的侵袭。研究表明，C-IFN-γ在犬瘟热、犬细小病毒病等常见病毒性疾病的防治中展现出了显著的效果，为犬的健康提供了重要保障。

在实际生产中，利用原核表达系统表达犬干扰素-γ是一种常用的方法。原核表达系统具有操作简单、成本低廉、表达量高等优点，能够满足大规模生产的需求。这种方式表达的犬干扰素-γ多以包涵体的形式存在。包涵体是蛋白质在原核细胞内错误折叠形成的无活性聚集体，虽然其结构稳定，但缺乏生物学活性，无法直接应用于临床治疗和研究。包涵体的形成主要是由于原核细胞的表达环境与蛋白质的天然折叠环境存在差异，导致蛋白质无法正确折叠，进而聚集形成包涵体。这不仅增加了后续处理的难度，还降低了蛋白质的活性和利用率。因此，如何将包涵体形式的犬干扰素-γ进行复性，使其恢复生物活性，成为了该领域研究的关键问题。

蛋白质复性是一个复杂的过程，受到多种因素的影响，如温度、pH值