紫外分光光度法操作标准与实战案例.pdfVIP

紫外分光光度法操作标准及案例

ax鉴别物质如核酸在nm有特征吸收纯度检查利用杂质的特征吸收判断纯度如甾体药物中杂质的限量检查二紫外分光光度法操作标准流程一样品制备样品处理的核心是保证样品均匀无干浓度适宜溶剂选择优先选用光谱纯溶剂如甲醇水正己烷要求截止波长溶剂吸光度时的波

一、紫外分光光度法基础知识

紫外分光光度法（UVSpectrophotometry）是基于物质对

____nm紫外光的选择性吸收，通过测定吸光度（A）来定量分析

的光谱技术。其核心是朗伯-比尔定律（Lambert-BeerLaw）：

$$A=\varepsilonbc$$

mL重新测定三吸收峰位置偏移原因波长未校准溶剂改变如用乙醇代替甲醇样品解离pH变化解决校准波长换回原溶剂用缓冲溶液控制pH如醋酸醋酸钠缓冲液四测定重复性差原因比色皿未擦净外壁有指纹样品不均匀有悬浮物仪器未预热解决用镜头纸擦净比色皿过滤样品延

A：吸光度（无单位，反映光被样品吸收的程度）；

ε：摩尔吸光系数（L/(mol·cm)，与物质性质、波长有关，衡