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2025年检验科人才PCR技术试卷与答案

一、单项选择题（每题2分，共30分）

1.下列关于PCR技术基本原理的描述，错误的是

A.依赖DNA聚合酶的链式扩增反应

B.需一对特异性寡核苷酸引物

C.扩增产物长度由模板决定

D.反应体系需dNTP作为原料

2.实时荧光定量PCR（qPCR）中，SYBRGreenⅠ染料的作用机制是

A.与双链DNA小沟结合发出荧光

B.与引物5端荧光基团发生FRET

C.特异性识别目标序列的探针

D.嵌入DNA双链碱基对之间发光

3.逆转录PCR（RT-PCR）中，若使用oligo(dT)引物进行逆转录，最适用于扩增的模板是

A.环状RNA

B.总RNA中的mRNA

C.线粒体DNA

D.病毒单链RNA

4.PCR反应体系中，Mg2+浓度过高可能导致的后果是

A.引物与模板非特异性结合增加

B.Taq酶活性被完全抑制

C.dNTP与Mg2+结合减少

D.退火温度显著升高

5.某实验室使用qPCR检测新型冠状病毒核酸，Ct值为38（仪器判读阈值为37），其结果应判定为

A.阳性（接近阈值需复检）

B.阴性（超过阈值无意义）

C.灰区（需重复实验确认）

D.无效（污染导致假阳性）

6.引物设计时，若目标序列GC含