T4 RNA连接酶1操作手册.pdfVIP

Molecular

Cloning

Laboratories

用户手册

Version

2.0

产品名称：T4

RNA连接酶1（单链RNA连接酶）

目录编号：T4RL1‑100、T4RL1‑200、T4RL1‑OEM、B‑TR1、ATP

描述：

T4

RNA连接酶1催化5‑磷酸化末端供体与3‑羟基末端受体之间的连接，形成3‑5磷酸二酯键，同时伴

随ATP水解为AMP和PPi。底物包括单链RNA、以及二核苷焦磷酸盐。

操作流程：

寡核苷酸连接单链（c）按如系设置20μl反应：1X反应缓冲

液，25%（重量/体积）PEG

8000，1mM六胺氯化钴（可选）10~20单位

T4

RNA连接酶，1mM

ATP。25°C孵育16小时。加入40μl

10mM

Tris‑HCl（pH

8.0）和2.5mM

EDTA终止反应。

RNA环化

5´

按如下设置20

μl反应体系：1×反应缓冲液

RNA（示例：10