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大肠杆菌与铜绿假单胞菌蛋白表达监测系统的构建与应用研究

一、引言

1.1研究背景

20世纪生命科学领域聚焦于基因组学研究，前半叶以遗传学为代表，后半叶以分子生物学为代表，最终“DNA双螺旋结构”和“中心法则”的提出为这一阶段画上句号。随着“人类基因组计划”的推进与完成，标志着“后基因组时代”来临，蛋白质组学作为“功能基因组学”的重要组成部分，被提上未来生命科学研究日程。

蛋白质组指一个基因组、一种生物或一种细胞/组织所表达的全套蛋白质，而蛋白质组学则是以蛋白质组为研究对象，探究细胞内所有蛋白质及其动态变化规律的学科领域。蛋白质作为生命活动的直接执行者，参与细胞代谢、信号传导、结构维持等诸多关键生命过程。然而，细胞或个体水平的蛋白质数量庞大、功能多样，传统实验手段难以全面研究。

目前蛋白质研究主要方法是2-DE配合质谱进行蛋白质分离鉴定。二维SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术（2-DE）利用蛋白质等电点和分子量差异进行分离，具有高分辨率和高通量特点，在比较蛋白质组学研究中发挥重要作用。但该技术存在局限性，对于低丰度、疏水性、偏碱性、极大和极小蛋白的显示效果不佳。色谱技术如液相色谱可基于蛋白质的不同性质进行分离，常与质谱联用。生物质谱技术包括基质辅助激光解吸电离质谱（MALDI-MS）和电喷雾电离质谱（ESI-MS）等，用于鉴定蛋白质的