细胞接种操作图示.pptxVIP

2026/06/27细胞接种操作图示汇报人：实验培训部

目录准备工作细胞处理接种操作培养维护质量控制注意事项010203040506

准备工作01

实验环境准备超净工作台准备台面、边角及空气过滤器彻底清洁消毒操作前30分钟开启紫外灯照射消毒30分钟关闭紫外灯后打开超净工作台通风30分钟环境参数控制温度：22-25℃湿度：50%-60%避免温度波动过大无菌操作核心关键90分钟完整准备周期30分钟×2次消毒+30分钟通风

器材与试剂准备器材与试剂准备高压蒸汽灭菌121℃，15分钟所有接触细胞的器材必须严格灭菌器材清单培养皿/瓶移液器吸头细胞计数板显微镜、离心机试剂准备细胞培养基胰蛋白酶磷酸盐缓冲液（PBS）胰蛋白酶抑制剂一次性使用原则移液器吸头必须一次性使用，杜绝交叉污染121℃温度15min时间

细胞准备细胞复苏冻存细胞解冻后立即置于37℃水浴中融化迅速转移至培养皿中细胞计数使用细胞计数板和台盼蓝染色法确保细胞浓度适宜细胞活力检测台盼蓝染色后显微镜观察活力应大于95%

细胞处理02

细胞消化消化方法向培养皿中加入含0.25%胰蛋白酶的PBS溶液消化时间根据细胞类型调整（通常5-15分钟）消化监测显微镜观察细胞收缩变圆未完全脱落时终止消化终止消化加入含血清的培养基终止消化避免细胞过度损伤

细胞收集→→1吸打细胞用移液器吸打培养皿底部，使细胞悬浮2离心收集将细胞悬液转移至离心管