利用同源重组机制对大肠杆菌fadD基因进行编辑及效果分析
摘要:序列替换是基因组编辑最直接、最有力的手段。但目前的基因编辑技术均对靶基因位点有一定的DNA序列要求,且主要通过非同源末端连接途径产生功能敲除(knockout,KO)的基因编辑效果,同源重组效率极低,不能高效地通过同源重组介导实现基因片段替换。本研究主要探究利用一种特殊发夹结构所启动的同源重组机制对大肠杆菌fadD基因进行编辑并进行效果分析。这种方法利用了大肠杆菌CRISPR/Cas3系统,可用于编程序列替换,具有开发简单、无原间隔基序(PAM)、无明显脱靶等优点。为菌种改良和基因缺陷型菌株的获得提供了新的方法。
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