CRISPR-Cas9 基因编辑脱靶风险管控.docxVIP

PAGE

1-

CRISPR-Cas9基因编辑脱靶风险管控

一、1.CRISPR-Cas9基因编辑技术概述

1.1CRISPR-Cas9技术原理

CRISPR-Cas9技术是一种基于细菌天然防御机制的基因编辑工具。它利用一段具有高度重复序列的RNA（crRNA）来引导Cas9蛋白识别并切割特定的DNA序列。这一过程类似于细菌对抗外来入侵者时使用的一种防御机制。在CRISPR-Cas9系统中，crRNA与Cas9蛋白结合形成复合体，然后通过碱基互补配对识别目标DNA序列。一旦识别到目标序列，Cas9蛋白就会在其上切割双链DNA，从而打断基因。这一切割过程可以用于多种基因编辑目的，包括基因敲除、基因敲入、基因修复等。

CRISPR-Cas9技术的核心是Cas9蛋白，它是一种名为RuvC的核酸内切酶。Cas9蛋白具有一个名为“NGG”的识别序列，该序列可以与crRNA上的互补序列结合，从而精确地定位到目标DNA序列。在切割过程中，Cas9蛋白在目标DNA序列的特定位置上引入双链断裂，这一断裂可以被细胞内的DNA修复机制所识别和修复。如果引入的是“供体DNA”，则可以用于基因敲入；如果引入的是“同源臂”，则可以用于基因修复。

CRISPR-Cas9技术的应用已经取得了显著的成果。例如，在2015年，美国科学家使用CRISPR-Cas9技术成功编辑了人类胚胎中的基因