高考生物一轮复习 6_真题分类 专题22 基因工程.docxVIP

专题22基因工程

考点1重组DNA技术的基本工具

(2024湖南,5,2分)某同学将质粒DNA进行限制酶酶切时,发现DNA完全没有被酶切,分析可能的原因并提出解决方法。下列叙述错误的是()

A.限制酶失活,更换新的限制酶

B.酶切条件不合适,调整反应条件如温度和酶的用量等

C.质粒DNA突变导致酶识别位点缺失,更换正常质粒DNA

D.酶切位点被甲基化修饰,换用对DNA甲基化不敏感的限制酶

答案B限制酶失活会使DNA完全不被酶切,此时应更换新的限制酶,A正确;酶切条件不合适通常会使切割效果下降,此时应有部分DNA被酶切,B错误;质粒DNA突变导致限制酶识别位点缺失,会造成限制酶无法进行切割,因此应更换为正常质粒DNA,C正确;质粒DNA上酶切位点被甲基化修饰,会导致对DNA甲基化敏感的限制酶无法进行酶切,此时应换用对DNA甲基化不敏感的限制酶,D正确。

(2023重庆,12,3分)某小组通过PCR[假设引物长度为8个碱基(短于实际长度)]获得了含有目的基因的DNA片段,并用限制酶进行酶切(如图),再用所得片段成功构建了基因表达载体。下列叙述错误的是()

A.其中一个引物序列为5-TGCGCAGT-3

B.步骤①所用的酶是SpeⅠ和CfoⅠ

C.用步骤①的酶对载体进行酶切,至少获得了2个片段

D.酶切片段和载体连接时,可使用E.coli连接酶或T4连接酶

答案B由