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动物细胞培养反应器实验报告

一、实验目的

掌握动物细胞培养反应器的基本结构、工作原理及操作流程。

学习动物细胞在生物反应器中的培养方法，包括接种、培养条件控制、取样检测等关键步骤。

研究不同培养条件（如温度、pH值、溶氧浓度等）对动物细胞生长和产物表达的影响。

初步掌握动物细胞培养过程中的数据监测与分析方法，为大规模动物细胞培养工艺的优化提供实验依据。

二、实验材料与设备

（一）实验材料

细胞株：选用中国仓鼠卵巢细胞（CHO细胞）作为实验对象，该细胞株具有生长速度快、易于培养、能高效表达重组蛋白等特点，广泛应用于生物制药领域。

培养基：采用DMEM/F12培养基（含10%胎牛血清、1%青霉素-链霉素溶液），用于CHO细胞的常规培养。在反应器培养阶段，使用无血清培养基进行培养，以避免血清成分对产物分离纯化的干扰。

试剂：胰蛋白酶-EDTA溶液（0.25%），用于细胞的消化传代；磷酸盐缓冲液（PBS），用于细胞的洗涤；台盼蓝染色液，用于细胞活力的检测；葡萄糖检测试剂盒、乳酸检测试剂盒，用于培养基中葡萄糖和乳酸浓度的测定。

其他材料：一次性无菌培养瓶、离心管、移液管、滤器（0.22μm）等。

（二）实验设备

动物细胞培养反应器：选用5L搅拌式生物反应器（型号：BIOTECH-5L），该反应器配备有温度控制系统、pH控制系统、溶氧（DO）控制系统、搅拌系统以及在线监测系统，可实现对培养过程