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PCR技术专项考核试题（含详细答案解析）

适用范围：医学检验、分子生物实验室、生物检测岗位基础考核

考试时长：90分钟

满分：100分

一、单项选择题（每题2分，共30分）

1.常规聚合酶链式反应（PCR）的原理核心是利用核酸的哪种特性？（）

A.核酸变性、复性、延伸的温度依赖性B.核酸的特异性杂交

C.核酸的电泳迁移特性D.核酸的紫外吸收特性

2.标准PCR反应中，变性步骤常用的温度是？（）

A.55～60℃B.72℃C.94～95℃D.37℃

3.PCR反应中负责合成新DNA链的核心酶是？（）

A.限制性内切酶B.TaqDNA聚合酶C.DNA连接酶D.逆转录酶

4.PCR引物的主要作用是？（）

A.解开DNA双链B.为DNA合成提供3’-OH末端，引导链延伸

C.稳定DNA双链结构D.提高反应体系温度

5.常规PCR延伸阶段的标准温度和主要原因是？（）

A.58℃，适配引物结合B.72℃，Taq酶最适催化温度

C.95℃，保证模板充分变性D.65℃，减少非特异性结合

6.以下哪种因素最容易导致PCR出现非特异性扩增条带？（）

A.退火温度过高B.退火温度过低C.延伸时间过长D.循环数过少

7.RT-PCR主要用于检测以下哪种物质？