大肠杆菌分子克隆载体专家讲座.pptVIP

第三节????????大肠杆菌分子克隆载体大肠杆菌分子克隆载体专家讲座第1页

一、E.coli克隆载体种类1.质粒载体—复制起点来自一些天然质粒。2.噬菌体载体—λ，P1和M13.fd载体，复制起点来自噬菌体。3.COS质粒载体—质粒载体中插入λcos片段，以利于体外包装4.噬粒载体（phagemid）—有质粒和M13.fd复制起点，以质粒或噬菌体方式复制。大肠杆菌分子克隆载体专家讲座第2页

二、质粒与质粒载体1.E．coli质粒种类1)colE1因子（大肠杆菌素因子)—多数不能进行接合转移DNA，属高拷贝松弛型。2)R因子（抗药性因子)可接合转移DNA，属低拷贝严紧型，质粒较大，操作不便3)F因子（性因子)大肠杆菌分子克隆载体专家讲座第3页

2.质粒特点1)质粒DNA复制与染色体复制无关2)质粒DNA以超螺旋形式存在3)质粒DNA能够接合转移4)质粒不相容性和不相容群5)质粒DNA消除—化学和物理法(吖啶染料，EtBr，高温等)6)