基因工程试验报告详细试验步骤指南.pdfVIP

实验一：大肠杆菌DH5α和BL21感受态细胞的制备

【实验步骤】

1从LB平板上挑取新活化的大肠杆菌DH5α单菌落，接种到5mLLB培养基中，

37℃振荡培养过夜。

2取1mL培养物接种到100mLLB培养基（250mL三角瓶）中，37℃振荡培养

2~3h。

实验一大肠杆菌DH和BL感受态细胞的制备实验步骤从LB平板上挑取新活化的大肠杆菌DH单菌落接种到mLLB培养基中振荡培养过夜取mL培养物接种到mLLB培养基mL三角瓶中振荡培养h将菌液转移到mL离心管管中冰上放置minrpm离心min弃去上

3将菌液转移到50mL离心管（2管）中，冰上放置15min。

44℃4000rpm离心5min，弃去上清液，倒置使培养液流尽。

2

5用20mL冷CaCl溶液悬浮菌体沉淀合并成一管，在4℃4000rpm离心

5min，弃去上

清液。

2

6用10mL冷CaCl溶液悬浮菌体沉淀，冰浴30min。