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2026年最新生物科学实验技能测评模拟试题及参考答案

一、实验操作情境选择题（每题2分，共20分）

1.在开展水稻OsGS1基因启动子碱基编辑以提升氮素利用效率的原生质体瞬时转染实验中，使用CRISPR-Cas12a核糖核蛋白（RNP）编辑系统，以下操作流程符合规范且编辑效率最高的是

A.配置0.5mol/L甘露醇作为等渗缓冲液，取水稻幼苗叶片切成1mm细条，加入纤维素酶-离析酶混合液后置于37℃、200rpm摇床振荡酶解30min，收集原生质体

B.酶解完成后用200目尼龙网过滤研磨后的酶解液，滤液经1000g离心5min收集原生质体沉淀，弃上清后用W5溶液重悬洗涤2次，调整原生质体浓度至1×10^6个/mL

C.将终浓度20nmol/L的Cas12a-crRNARNP复合体与等量携带同源臂的ssDNA修复模板室温共孵育10min后，采用终浓度20%的PEG-4000介导转染，转染完成后暗培养28℃48h，收集细胞提取基因组DNA进行编辑效率检测

D.转染48h后加入0.4%台盼蓝染液染色5min，选取被染成深蓝色的原生质体作为活细胞样本，通过PCR扩增靶点区域结合Sanger测序计算编辑效率

2.在开展健康人肠道厌氧微生物高通量培养组学实验时，以下操作存在明显错误的是

A.采集粪便样本后立即装入预还原的厌氧转运管，密封后置于4℃保温箱转运，确保采样后2h内转入厌