乙型肝炎病毒标志物的检测.pptVIP

乙型肝炎病毒标志物检测;试验目标和要求;①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。

②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶活性。在测定时，把受检标本（测定其中抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不一样步骤与固相载体表面抗原或抗体起反应。用洗涤方法使固相载体上形成抗原抗体复合物与其它物质分开，最终结合在固相载体上酶量与标本中受检物质量成一定百分比。加入酶反应底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物量与标本中受检物质量直接相关，故可依据颜色反应深浅进行定性或定量分析。;（一)基本原理;（二)试验试剂;1.双抗体夹心法;（3)加酶标抗体：使固相免疫复合物上抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合酶标抗体。此时固相载体上带有酶量与标本中受检物质量正相关。

（4)加底物：夹心式复合物中酶催化底物成为有色产物。依据颜色反应程度进行该抗原定性或定量。;1、把抗体固定在固相支持物上（96孔板）；

2、加入蛋白质样品保温，再洗去未结合杂蛋白；

3、加入第二抗体，第二抗体结合一个供检测用酶（辣根过氧化物酶）

4.洗去未结合第二抗原，酶活测定。;2.间接法测抗体;（3)加酶标抗抗体：与固相复合物中抗体结合，从而使该抗体间接地标识上酶。洗涤后，固相载体上酶量就代表特异性抗体量。比如欲测人对某种疾病抗体，可用酶标羊抗人IgG抗体。