PCR技术线上考核试卷.docxVIP

PCR技术线上考核试卷

考试时长：60分钟满分：100分

适用：分子检测岗位

一、单项选择题（每题2分，共30分）

PCR反应中，负责合成新DNA链的酶是（）

A.限制性内切酶

B.TaqDNA聚合酶

C.DNA连接酶

D.逆转录酶

答案：B

解析：TaqDNA聚合酶来源于嗜热菌，耐高温，是常规PCR扩增的核心酶；限制性内切酶用于切割DNA，DNA连接酶用于连接核酸片段，逆转录酶以RNA为模板合成cDNA。

PCR变性步骤常用温度一般为（）

A.50～55℃

B.60～65℃

C.94～96℃

D.72℃

答案：C

解析：变性阶段高温破坏DNA双链之间氢键，使双链解旋为单链，常规设置94～96℃；退火温度多为50～65℃，延伸常用72℃。

PCR退火步骤的主要作用是（）

A.双链DNA解链

B.引物与模板单链DNA互补结合

C.聚合酶延伸子链

D.产物终末保温

答案：B

解析：退火（复性）阶段温度下降，引物依靠碱基互补配对，结合到对应的模板序列上，为DNA链延伸做准备。

标准PCR一个循环的顺序是（）

A.退火→变性→延伸

B.变性→退火→延伸

C.延伸→变性→退火

D.变性→延伸→退火

答案：B

解析：每个循环依次为高温变性解链、中温退火引物结合、72℃附近聚合酶延伸DNA链。

dNTP在PCR体系中的作用是（）

A.引物

B.缓冲盐离子