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基因工程简介 作者：张科 第三节 ?知识要点： 1．? 知道基因工程的概念 2．? 知道基因操作的工具和基本步骤 3. 知道基因工程所取得的成果和发展前景 基因工程简介 ２．基因操作的工具 转黄瓜抗青枯病基因的甜椒 转鱼抗寒基因的番茄 转黄瓜抗青枯病基因的马铃薯 不会引起过敏的转基因大豆 3、基因工程与环境保护 ⑴　环境监测：　　基因工程做成的DNA探针能够十分灵敏地检测环境中的病毒、细菌等污染。 1t水中只有10个病毒也能被DNA探针检测出来 　　利用基因工程培育的“指示生物”能十分灵敏地反映环境污染的情况，却不易因环境污染而大量死亡，甚至还可以吸收和转化污染物。 ⑵　环境污染治理：　　基因工程做成的“超级细菌”能吞食和分解多种污染环境的物质。 　　通常一种细菌只能分解石油中的一种烃类，用基因工程培育成功的“超级细菌”却能分解石油中的多种烃类化合物。有的还能吞食转化汞、镉等重金属，分解DDT等毒害物质。 * * 基因工程简介 实例：用大肠杆菌生产人的胰岛素 操作步骤：将人的胰岛素基因转移到大肠杆菌中，通过微生物的发酵使大肠杆菌表达人的胰岛素基因，从而获得人的胰岛素。 通俗地说，就是按照人们的意愿，把一种生物的个别基因复制出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向改造生物的遗传性状。 人类需要的基因产物 结果 “剪切”“拼接”“导入”“表达” 基本过程 DNA分子水平 操作水平 基因 操作对象 生物体外 操作环境 基因拼接技术或DNA重组技术 基因工程名称 １. 基因工程的概念 这种技术是在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切” 和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的基因产物。 问题1 怎样获得人的胰岛素基因？ ——目的基因的提取 问题2 怎样将目的基因导入到受体细胞中？ ——目的基因与运载体结合 问题3 怎样将重组质粒导入到受体细胞中？ ——将目的基因导入到受体细胞 问题4 目的基因是否在受体细胞中表达？ ——目的基因的检测和表达 （1）基因的剪刀——限制性内切酶 存在：主要存在于微生物 作用与特性：一种酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的内切点切割DNA分子。 种类：200多种 重播 　　DNA被限制酶切断后有两个反向互补的“黏性末端”。被同一种限制切断的几个DNA具有相同的黏性末端，能够通过互补进行配对。 （2）基因的针线——DNA连接酶 两条DNA末端之间的缝隙“缝合”起来。 ２、基因的针线──DNA连接酶 　　连接酶的作用是：将互补配对的两个黏性末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子。 重播 ２、基因的针线──DNA连接酶 　　连接酶的作用是：将互补配对的两个黏性末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子。 目前常用的两类运载体 一类是细菌的质粒，它是细菌染色体DNA以外的小型环状DNA(一般有1-200kb，kb为千碱基对)，有的细菌只 有一个，有的细菌有多个 第一类是噬菌体和某些病毒的DNA。 一般来说，天然运载体往往不能满足人类的所有要求，因此人们根据不同的目的和需要，对某些天然的运载体进行人工改建。 （3）基因的运载工具——运载体 使用运载体的目的 一是用它作为运载工具，将目的基因送到宿主细胞中去 运载体应具备的三个条件 (1)能在宿主细胞内稳定保存并大量复制 ——含复制起始点 (2)有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 ——克隆位点 (3)具有某些标记基因，以便进行筛选 质粒是否导入 目的基因是否插入 　　目前被较广泛提取使用的目的基因有：苏云金杆菌抗虫基因、人胰岛素基因、人干扰素基因、种子贮藏蛋白基因、植物抗病基因等。 ㈡　基因操作的基本步骤 １、提取目的基因——将　需要的基因从供体生物　的细胞内提取出来。 供体生物细胞 取出DNA 用限制酶剪去多余部分 目的基因 限制酶 提取目的基因的方法 　用限制酶切断成许多片段 ⑴直接分离基因——鸟枪法 　　将供体生物的DNA用限制酶切割为许多片段，再用运载体将这些片段都运载到受体生物的不同细胞中去。只要有一个细胞获得了需要的目的基因并得以表达，基因工程就算成功了。　　该法最大的缺点是带有很大的盲目性，工作量大，成功率低。且不能将真核生物的基因转移到原核生物中去。 ⑵人工合成基因法 DNA合成仪 有两种方