专题2 微生物的培养与应用.pptVIP

一、微生物基础知识 细菌的外形与大小 细菌：单细胞不分枝的原核微生物。 细菌细胞微小而透明，通常用适当染料染色后显微镜观察 菌落： 单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。 菌落是鉴定菌种的重要依据。 2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？ 以免接种环温度太高，杀死菌种。 3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 2.稀释涂布平板法 将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养。 在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。 稀释涂布平板法操作过程分两个步骤，即系列稀释操作和涂布平板操作。 系列稀释操作 101 102 103 104 105 106 (1)将分别盛有9mL水的试管灭菌并编号。 (2)用移液管吸取1mL培养的菌液，注入第二支试管中，轻压橡皮头，吹吸三次使之充分混匀。 (3)从101倍稀释的试管中吸取1mL稀释液，注入第三支试管中，重复步骤2，直至到第六支试管。 涂布平板操作 (1)将涂布器浸在盛有70％的酒精的烧杯中。 (2)取少量菌液(不超0.1mL),滴加到培养基表面. (3)将沾有酒精的涂布器在火焰上引燃，火熄后冷却8～10s。 (4)用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。 涂布平板操作讨论 涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？ 应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围；等等。 将接种后和未接种（作为对照组）的培养基均放到370C的恒温箱中，培养12～24h后进行观察并记录结果。 五、结果分析与评价 1.未接种的培养基表面是否有菌落生长？如果有菌落生长，说明了什么？ 未接种的培养基在恒温箱中保温1～2 d后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。 2.在接种大肠杆菌的培养基上，能否观察到独立的菌落？它们的大小、形状、颜色相似？ 如果接种成功的话，在培养基的表面可观察到大小、形状、颜色相似的菌落。 3.培养12h和24h后，观察到的实验结果相同吗？如果不同，请分析产生差异的原因？ 培养12 h与24 h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同。随着时间的延长、菌落的不断生长，使菌落不断增大。 4.如果在培养基上观察到不同形态的菌落，请分析其可能的原因。 无菌操作未达到要求： 可能是培养基灭菌不彻底； 可能是接种时发生了污染； 也可能是在培养的过程中受到了污染。 * 专题2 :微生物的培养与应用 了解有关培养基的基础知识，进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。 课题目标： 掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平板划线法等基本操作技术，熟练、规范地进行无菌操作，成功地培养微生物。 无菌技术的操作。 课题重点和难点： 技能目标： 1、微生物包括五类： 病毒 细菌 放线菌 真菌 原生动物 2、特点：结构都相当简单,个体多数十分微小.通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构。且体内一般不含有叶绿素.不能进行光合作用。 原核生物界 原生生物界 真菌界 病毒界 A.球菌 B.杆菌 C.弧菌 常见的三种细菌典型形态 有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌。 细菌的菌落特征因种而异 放线菌 结构： 单细胞原核 分支状的菌丝 (基内菌丝、气生菌丝) 链霉素、土霉素、四环素、 氯霉素、红霉素、庆大霉素 微生物中发现了几千种抗生素，其中2/3是 由放线菌产生的 应用: 病毒的结构 SARS病毒 禽流感病毒 如图是酵母菌电子显微镜下的形态结构 酵母菌和霉菌 青霉 真菌 二、培养基 1、概念: 培养基（培养液）是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的营养基质。 (1)根据物理性质分 固体培养基——用于微生物的分离计数 半固体培养基——观察微生物的运动、鉴定菌种 液体培养基——常用于工业生产 (2)