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* * 2.2 动物细胞工程 基础知识梳理 单个细胞 繁殖 一、动物细胞培养 1．概念：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成 ，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和 。 2、动物细胞培养的流程： 取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。 注意：细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。 无菌 血清 7.2～7.4 二氧化碳 单克隆抗体 3．条件 (1)无菌、无毒的环境：培养液应进行 处理。 (2)营养(合成培养基成分)：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素，通常需加入 、血浆等。 (3)温度：适宜温度36.5±0.5 ℃；pH 。 (4)气体环境：空气95%， 5%。 4．应用：如病毒疫苗、干扰素、 。 二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 1．动物核移植 是将一个动物细胞的 移入一个去核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个胚胎最终发育为动物个体。 2．种类 (1)体细胞核移植：难。 (2) 移植：易。 细胞核 胚胎细胞核 二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 3．过程 4．应用 (1)加速家畜 改良进程，促进 繁育。 (2)保护濒危物种。 (3)生产 。 (4)作为异种移植的 。 (5)用于组织器官的移植。 5．问题 克隆动物存在 、生理缺陷、 等 遗传 良种畜群 医用蛋白 供体 健康问题 遗传缺陷 两个或多个 杂交 DNA 远缘 三、动物细胞融合 1．概念 动物细胞结合形成一个细胞的过程，又叫细胞杂交。 2．结果：形成 细胞。 四、单克隆抗体 1．抗体的产生：B淋巴细胞产生的抗体具有特异性。 2．单克隆抗体的制备 (1)过程 (2)杂交瘤细胞特点： 。 (3)单克隆抗体的优点： 。 3．单克隆抗体的应用 (1)作为诊断试剂：准确识别各种 物质并特异性结合。 (2)用于治疗疾病和运载药物：制成“ ”。 生物导弹 抗原 既能大量增殖，又能产生单一抗体 特异性强、灵敏度高、产量大 动物细胞培养与动物体细胞核移植 【注意】　(1)动物细胞培养中两次用到胰蛋白酶，第一次用胰蛋白酶处理剪碎的组织使之分散成单个细胞，第二次使贴壁细胞从瓶壁上脱落下来。 (2)原代培养与传代培养的分界点为分瓶的继续培养。 例题分析 1.下列关于动物细胞培养的叙述中，正确的是(　　) A．培养中的人的效应T细胞能产生单克隆抗体 B．培养中的人的B淋巴细胞能够无限地增殖 C．人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株 D．用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞 D 2（11年上海卷）．关于哺乳动物细胞体外培养的难易程度，下列表述正确的是（ ） A．乳腺癌细胞易于乳腺细胞，胚胎细胞易于脂肪细胞 B．乳腺细胞易于乳腺癌细胞，胚胎细胞易于脂肪细胞 C．乳腺细胞易于乳腺癌细胞，脂肪细胞易于胚胎细胞 D．乳腺癌细胞易于乳腺细胞，脂肪细胞易于胚胎细胞 A 二、动物细胞融合与单克隆抗体制备 1．原理：细胞膜的流动性。 2．诱导融合的因素：聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒、电激等。 3．意义：最重要的用途是制备单克隆抗体。 4．单克隆抗体的制备 (1)过程 (2)单克隆抗体的主要优点：特异性强、灵敏度高，并可大量制备。 【注意】　灭活是指用物理或化学方法使病毒或细菌失去感染能力，但是并不破坏这些病原体的抗原结构。 动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较： 制备单克隆抗体的技术之一 除应用植物细胞杂交手段外，再加灭活的病毒诱导 使细胞分散后诱导细胞融合 细胞膜的流动性 动物细胞融合 克服了远缘杂交的不亲和性，获得杂种植株 离心、电刺激、振动，聚乙二醇等试剂诱导 去除细胞壁后诱导原生质体融合 细胞膜的流动性 植物体细胞杂交 用法 诱导手段 细胞融合的方法 细胞融合的原理 比较