2.2.1动物细胞培养和核移植技术教学用.pptVIP

植物细胞工程常用的技术手段有哪些？ 那么动物细胞常用的技术手段呢？ 细胞贴壁过程 动物细胞生长特性 原代培养 (primary culture) 定义：把第1代细胞的培养与传10代以内的细胞培养统称为原代培养。 传代培养 (subculture) 定义：当原代培养的细胞生长停止，这时如果要使细胞继续生长，就要及时用胰蛋白酶等，使细胞从瓶壁上解离下来，然后加入新的培养液，将细胞分离稀释，并从原培养瓶内转接到新的培养瓶内，这个过程称传代培养 动物细胞培养条件总结： 1、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） 2、营养 （葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。） 3、温度和PH 36.5+（-）0.5度, 7.2-7.4 4、气体环境： O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） 胚胎移植－动物幼体产出概率＜10％ 克隆动物存在着健康问题。例如：许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体型过大，异常肥胖，发育困难，脏器缺陷，免疫失调等。 克隆动物的食品安全性问题存在争议 动物细胞培养能获得克隆个体吗？如何才能获得克隆动物？ 黑面绵羊去核卵母细胞 白面绵羊乳腺细胞核 细胞核移植 重组细胞 电脉冲刺激 早期胚胎 胚胎移植 另一头绵羊的子宫 妊娠、出生 克隆羊多利 四、动物体细胞核移植技术和克隆动物 归纳动物核移植定义： 将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体（克隆动物） 动物细胞全能性受限。 分 类 胚胎细胞核移植： 体细胞核移植： 细胞分化程度低，恢复全能性容易 细胞分化程度高，恢复全能性不容易 四、动物体细胞核移植技术和克隆动物 卵细胞 Ａ母绵羊 Ｂ母绵羊 乳腺细胞 细胞质 细胞核 细胞核移植 早期胚胎 卵裂 C母绵羊子宫 胚胎移植 多莉羊 分娩 妊娠 多莉羊的培育过程 融合后的卵细胞 阅读p47思考： 1、哺乳动物核移植可以为哪几类？全能性如何？ 2、动物克隆实例很多，为何多莉就举世闻名呢？ 四、动物体细胞核移植技术和克隆动物 “多莉” 是世界上第一例经体细胞核移植出生的动物。这一巨大进展证明了分化了的动物细胞核具有全能性． 四、动物体细胞核移植技术和克隆动物 1997年，美国威斯康星州的一个奶牛场有一头名叫卢辛达的奶牛，年产奶量为30.8 t，创造了世界奶牛产奶量最高新纪录。目前世界各国高产奶牛场奶牛，年平均产奶量一般为十几吨，而我国奶牛产奶量年平均水平仅为3～4 t。 能否依据“多利”的培育过程，进行优质奶牛的快速繁育？请说明理由。 体细胞的细胞核具有全能性。 读图2-21，思考： 1、对比多莉羊和高产奶牛的克隆过程，找出操作过程的不同点？ 2、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？ 3、为什么用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞？ 4、体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？ 5、多莉羊和高产奶牛的克隆过程,哪一种更科学且易操作？ 6、简述高产奶牛的克隆过程。 四、动物体细胞核移植技术和克隆动物 1、对比多莉羊和课本高产奶牛的克隆过程，找出操作过程的不同点？ 多莉克隆过程的受体细胞是去核卵细胞，而高产奶牛的克隆过程的受体细胞是去核次级卵母细胞； 多莉克隆过程是将供体细胞核注入受体细胞，而高产奶牛的克隆过程是将供体细胞注入受体细胞。 四、动物体细胞核移植技术和克隆动物 2、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？ 为使核移植动物的遗传物质全部来自有利用价值的动物提供的细胞。 四、动物体细胞核移植技术和克隆动物 3、为什么用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞？ 10代以内的细胞一般保持正常二倍体的核型，未发生突变。 四、动物体细胞核移植技术和克隆动物 4、体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？ 不是，克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞核，但核外还有少部分DNA（如线粒体DNA）来自受体卵母细胞 四、动物体细胞核移植技术和克隆动物 5、多莉羊和高产奶牛的克隆过程,哪一种更科学且易操作？ 卵母细胞当中的细胞周期蛋白含量、活性比卵细胞高，用它作受体更容易成功。 将供体细胞注入受体细胞，使克隆动物更像供体动物。 高产奶牛的克隆过程操作简便。 四