驱虫斑鸠菊注射液药理研究.pdfVIP

驱虫斑鸠菊注射液药理研究 1.驱虫斑鸠菊对小鼠免疫功能的影响.方法:采用rH]-TdR 掺入法和脾 细胞介导羊红细胞定量溶血分光光度法以及迟发型超敏反应试验等观察了 驱虫斑鸠菊对小鼠免疫功能的作用.结果:驱虫斑鸠菊在体内外均可以明显 抑制ConA 刺激的小鼠T 淋巴细胞的增殖反应和LPS 刺激的小鼠B 淋巴细胞 的增殖反应(P0.01);对小鼠胸腺指数和脾脏指数、绵羊红细胞(SRBC)诱导 的正常小鼠脾抗体细胞生成反应以及小鼠皮肤迟发型超敏反应都显示出明 显的抑制作用,而且上述抑制作用与药物浓度有一定的剂量效应关系.结论: 驱虫斑鸠菊对机体体液免疫、细胞免疫都有明显的抑制作用. 2.驱虫斑鸠菊(VW)注射液治疗白癜凤的作用机制。进行以下实验探讨 VW 对小鼠免疫功能的影响：淋巴细胞转化试验测定小鼠脾T、B 细胞增殖活 性；脾细胞介导羊红细胞定量溶血分光光度法测定B 细胞生成抗体活性， 流式细胞法测定B 细胞上CD19 表达活性；迟发型超敏反应(DTH)试验测定T 细胞活性、[^3H]-TdR 掺入法测定T 细胞分泌 IL-2 活性等。用酶学方法研 究VW 对小鼠体内酪氨酸酶的作用。用半定量逆转录聚合酶链反应技术检测 酪氨酸酶基因表达活性。结果表明，VW 可以明显抑制小鼠体内T、B 细胞的 增殖反应(P0．01)；对绵羊红细胞(SRBC)诱导的正常小鼠脾脏抗体形成细 胞活性、CD19B 细胞亚类表达、小鼠DTH 反应和T 细胞分泌 IL-2 活性也具 有明显的抑制作用，这些抑制作用与药物浓度有一定的剂量效应关系。VW 还可以提高小鼠血清酪氨酸酶活性，增强酪氨酸酶基因的表达。以上结果 说明，VW 可抑制小鼠免疫功能，可以从转录水平增强酪氨酸酶活性，进而 促进黑素合成。 3.采用体外培养的人A375 黑素细胞作模型进一步研究驱虫斑鸠菊注射 液活性成分黄酮对 A375 细胞形态、酪氨酸酶活性.黑素含量以及细胞增殖 的形晌，旨在研究该药治疗白癜风的作用机理，为其在临床上广泛应用提 供理论依据。结果：1.驱虫斑鸠菊对 A375 人黑素瘤细胞形态影响 药物作 用 48 h 后 A375 人黑素瘤细胞形态变化可见，与对照组相比，驱虫斑鸠菊 有效成分黄酮的浓度下细胞形态生长正常，密度增加，树突增多并延长， 但当药物浓度继续增高时，细胞内颗粒增多，失去光泽，甚至死亡，显示 出明显的细胞毒性。2.驱虫斑鸠菊对A375 黑素瘤细胞酪氨酸酶活性的影响 驱虫斑鸿菊在作用 24 h 小时后酪氨酸酶活性未见明显增加，作用 48 h 后 酪氨酸酶活性明显增加。其次，当驱虫斑鸠菊浓度在 3x1 0--3x 10-4 叱 甸范围时，随浓度增加酪氨酸酶活性逐渐增强，浓度再增加，则酪氨酸酶 活性反而下降。其可能的原因是商浓度的驱虫斑鸿菊在体外可能对A375 黑 素瘤细胞有毒性作用，从而抑制了酪氨酸酶的分泌。3.驱虫斑鸠菊对 A375 黑素瘤细胞代谢活性的影响 用MIT 比色法测定不同浓度驱虫斑鸠菊体外对 培养 72 h 的 A375 细胞增殖的影响，可见，驱虫斑鸠菊的浓度在一定范围 内可使A375 黑素瘤细胞代谢加快，表现为随药物浓度增加，570 nm 光密度 吸收值增加。当超过该浓度范围时对细胞生长产生毒性作用形态上可见大 部分细胞死亡，570nm 光密度吸收住下降。4.驱虫斑鸠菊对 A375 黑素瘤细 胞黑素含里的影响 驱虫斑鸿菊对A375 黑素瘤细胞作用4d 后测定黑素含量， 结果在所侧定驱虫斑鸠菊的浓度范围内，随药物浓度增高，黑素含量不断 增加，与驱虫斑鸠菊对A375 黑素瘤细胞酪氨酸酶活性、细胞增殖活性的影 响稍有不同，对黑素含含量的影响未出现高浓度的抑制现象。结论： 以前 的研究发现驱虫斑鸠菊可在体外激活酪氨酸酶活性，此结果显示，驱虫斑 鸠菊可能在诱导黑素合成过程中发挥作用。为了进一步研究驱虫斑鸠菊诱 导黑素合成的机制，本研究用人A375 黑素瘤细胞作为模型，研究该药在体 外培养的细胞水平对细胞生长、酪氨酸酶活性及合成黑素的影响。结果显 示，药物作用 24 h 后，未见驱虫斑鸠菊对细胞酪氨酸酶活性有影响，在 48 h 到 72 h 后测定时，可见酪氨酸醉活性明显升高，而且随着剂量增加，酪 氨酸酶活性有所增加，但当浓度达到一定时，则出现细胞毒性作用，表现 为细胞变形死亡。说明驱虫斑鸠菊不仅在体外直接激活酪氨酸酶活性，对 体外培养的细胞也具有促酪氨酸酶活性合成作用。这一结果与其对细胞生 长活性影响十分相似；对分泌黑素功能也随药物剂增加，出现明显促进作 用。 -- 白癜风药品，