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* 转基因 转基因的 基因工程及其应用 授课人：张康敏 基础知识预习 传统育种的局限性：一般只能在 同种生物 中进行，很难将 一种生物的优良性状 移植到 另一种生物身上 。 1．基因工程概念：又叫 基因拼接技术 或 DNA重组技术 。通俗地说，就是按照人们的意愿，把 一种生物 的某种基因提取出来，加以 修饰改造 ，然后放到 另一种生物 的细胞里， 定向 改造生物的遗传性状。 基因工程是在 DNA 上进行的 分子 水平的设计施工。 2．基因工程的工具： （1）基因的“剪刀”--- 限制性核酸内切酶 ，简称 限制酶 。 （2）基因的“针线”--- DNA连接酶 。当用 同种限制酶 切割两种来源不同的DNA后，露出的末端可以通过 碱基互补 黏合起来，但DNA骨架上的缺口仍需要靠 DNA连接酶 来“缝合”。 （3）基因的运载体---是指 将外源基因送入受体细胞 的运输工具。目前常用的运载体有 质粒 、 噬菌体 和 动植物病毒 等。质粒是最常用的运载体，存在于 许多细菌和酵母菌 等生物中，是 拟核或细胞核 外能够 自主复制 的 环 状DNA分子。 供体生物细胞 取出DNA 用限制酶剪去多余部分 目的基因 第一步：提取目的基因 基因工程的基本步骤 思考： ①限制酶有什么特点？ ②如果用同一种限制酶切割不同的DNA，产生的黏性末端之间有什么关系？ ③限制酶切的是DNA中的 和 之间的化学键 专一性（识别特定序列、特定切点） 碱基互补 脱氧核糖 磷酸 基因的“剪刀”──限制性内切酶（限制酶） 黏性末端 黏性末端 第二步、目的基因与运载体结合 基因工程的基本步骤 思考： ①目的基因能否直接导入受体细胞？ ②切割运载体和目的基因往往是用同一种限制酶还是两种？为什么？ ③DNA连接酶可以“缝合”DNA中 和 之间的缺口 质粒 不能。 同一种。 产生互补的黏性末端 脱氧核糖 磷酸 第三步：将目的基因导入受体细胞 导入 扩增 第四步、目的基因的检测和鉴定 检测：目的基因是否成功导入 鉴定：目的基因是否表达 基因工程的基本步骤 知识小结 用 切割DNA获取目的基因 用 切割运载体，再用 将目的基因与运 载体连接形成 . 检测目的基因 ，并鉴定目的基因 . （目的基因在受体细胞中可以进行 、 、 ） 将目的基因导入 . 限制酶 同种限制酶 DNA连接酶 重组DNA 受体细胞 是否导入 是否表达 复制 转录 翻译 巩固练习 1、下列关于基因工程的叙述，错误的是（ ） A.重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体 B.限制酶和DNA连接酶作用的都是脱氧核糖和磷酸之间的化学键 C.常用相同的限制性内切酶处理目的基因和质粒 D.基因工程育种的优点之一是目的性强 A 2. 采用基因工程的方法培育抗虫棉，下列导入目的基因的做法正确的是（ ） ①将毒素蛋白注射到受精卵 ②将编码毒素蛋白的DNA序列，注射到棉受精卵中 ③将编码毒素蛋白的DNA序列，与质粒重组，导入细菌，用该细菌侵染棉的体细胞，再进行组织培养 ④将编码毒素蛋白的DNA序列，与细菌质粒重组，注射到棉的子房并进入受精卵 A. ①② B. ②③ C. ③④ D. ④① c *