第七部分 生物技术.pdfVIP

生物技术 现代生物技术 分子杂交与遗传标记 （如RFLP技术） 基因工程 （核心内容） 蛋白质工程 细胞工程 （如克隆技术，干细胞工程） 酶工程 发酵工程 高通量组学芯片技术 。。。。。。 分子生物学基本技术 如： （一）核酸分子（基因组）的提取技术 （二）电泳技术 （一）核酸分子的提取技术 分类：RNA 的提取 总DNA 的提取 质粒DNA 的提取 （二）电泳技术 带电物质在电场中向相反电极移动的现象称为电泳。 概念：各种生物大分子在一定pH值条件下，可以解离成带 电荷的离子，在电场中会向相反的电极移动。 分类：琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、脉冲电 场凝胶电泳。 生物技术之分子标记 1. 限制性内切酶图谱多态性技术 （restriction fragment length polymorphism RFLP） RFLP 能反映生物个体或种群间基因组中某种差异 特征的DNA片段 可检测基因的点突变 限制性内切酶 限制性核酸内切酶: 识别并切割特异的双链DNA序列的一种内切核酸酶 基因突变后，使限制性内切酶切点改变， 导致电泳条带的改变。 特点 A ．识别序列–4，5 或6个碱基对 EcoR I 识别 5’-G/AATTC- 3’ 3’-CTTAA/G- 5’ B ．180度旋转对称回文结构 C．产生粘性末端和平末端 限制性内切酶图谱多态性技术 （RFLP） 基因突变后，使限制性内切酶切点改变， 导致电泳条带的改变。 限制酶切图谱分析能检测DNA的差异 DNA 的凝胶电泳 DNA 的探针杂交 基因组DNA 或经EcoRI 酶 切后琼脂糖电泳图。1，2 ， 3 为基因组DNA ；2 ，4 ，6 为EcoRI 酶切。 利用RFLP技术分析基因突变 R1 R1 10 Kb Chm1 3 Kb 7 Kb Chm2 R1 R1 R1 Cloned single-copy DNA marker that can detect EcoR1 RFLP 10/10 10/7+3 7+3/7+3 Homozygote Heterozygot