支原体肺炎的诊治.pptVIP

肺炎支原体感染的实验室诊断 儿科 韩殿丽 概述 支原体是一类能在无生命人丁培养基中生长、繁殖的最小原核型微生物，该类病原体中对人类致病的有肺炎支原体、人型支原体、解脲脲原体等。肺炎支原体是介于细菌和病毒之间的一种病原微生物。 无细胞壁，能通过细菌滤器，需要含胆固醇的特殊培养基，在接种10天后才出现菌落，菌落很小，很少超过0.5mm。革兰氏染色阴性。 肺炎支原体感染的特点： 肺炎支原体感染广泛发生于世界各地。平时散在发病，3-7年一次性地区流行。支原体肺炎好发年龄为5-30岁。潜伏期可长达2-3周，支原体肺炎是Mp感染的主要表现。 Mp感染引起的急性呼吸道感染除肺炎外绝大部分表现为咽炎、扁桃体炎及急性支气管炎和毛细支气管炎等。Mp可诱发哮喘、慢性阻塞性肺疾病等急性发作。可累及神经、血液、心血管等系统,以及皮肤、肌肉、关节等器官。 肺炎支原体的实验室诊断： 由于Mp无细胞壁，作用于细胞壁的抗菌药物对其没有杀伤作用，故Mp引起感染的治疗与其他细菌和病毒感染的治疗方案不同。因此及时有效地Mp感染的实验室诊断是十分必要的，它可及时指导临床治疗，进而预防可能发生的流行和并发症。 1、常用的肺炎支原体实验室诊断方法： 目前国内外采用的Mp诊断方法主要包括经典的培养法、血清学抗体检测法、抗原检测法、、核酸检测等方法。 检测Mp IgG抗体应采急性期及发病后2-3周的双份血清抗体进行比较。血清IgG抗体呈4倍以上升高或降低者，同时Mp分离阳性者，有绝对诊断意义。血清IgM抗体阳性伴Mp分离阳性者，也可明确Mp感染诊断。 如仅有4倍以上IgG抗体改变或IgM阳性，推测有近期感染，应结合临床表现进行诊断。 2、肺炎支原体实验室诊断方法探讨： Mp的分离培养和鉴定可以客观反映Mp感染的存在，至今仍是支原体鉴定的金标准，可用于验证各种其他方法的检测结果。其缺点是费时耗力，由于Mp对培养条件要求苛刻，生长缓慢，作出判断需3-4周。当标本中Mp 数量极少、培养基营养标准不够或操作手法不当时，均会出现假阴性。因此，多数实验室诊断都采取血清学方法。 （1）、血清学检测方法: 最早是应用补体结合实验，现已被改良。 20世纪八十年代以来许多方法进入市场：间接免疫荧光、颗粒凝集试验和酶联免疫试验。 间接免疫荧光法的结果判断受人的主观影响，并需要荧光显微镜，还可受到类风湿因子的影响，使其试剂盒的使用受到限制。 颗粒凝集试验，主要是利用乳胶和凝胶作为携带颗粒与实验血清进行孵化。如果血清中含有特异抗体，颗粒附着，产生可见反应。但其检出的阳性标本，多不能区分IgG和IgM。除了操作简单，与其他实验技术相比没有任何优势。 酶联免疫试验(EIA)在检测急性感染时比培养法敏 在PCR法与培养法联合使用时，PCR检测阳性而培养结果阴性很容易用PCR法的敏感性解释。但是，当PCR阴性而培养结果或血清学检测阳性时，必须考虑到PCR实验中出现了抑制因素或实验技术问题，稀释标本可能减少PCR抑制因素，但同时可能降低PCR的敏感性。 阳性的PCR结果和阴性的血清学结果同时出 现，可能是由于标本采集过早，抗体尚未产生的原因；而PCR结果阴性，伴随IgG或IgM水平久高不降，也有血清学检测假阳性的可能；经抗生素治疗后24小时的标本，PCR结果可能是阴性的，但血清学检测结果可以是阳性的。总之要结合临床表现和治疗情况综合判断实验结果。 谢谢！ * * 感，在有足够的抗体产生时间，而且患者免疫系统正常情况下，其敏感性相当于PCR。 （2）抗原检测：包括直接免疫荧光、对流免疫电泳、免疫印迹和抗原捕获EIA。这些方法敏感性较低、与其他支原体存在交叉反应，使其应用受到限制。 （3）核酸检测：1980年以来，人们通过实验室和临床研究，确定了PCR方法检测Mp感染的可靠性，认为可以用PCR方法与血清学方法和或培养法联合进行临床诊断。 PCR优点：可以检测经过处理用于组织学检测的 组织，或者已经污染不能进行分离培养的组织；只需要一份标本；一天内可以完成检测；与血清学方法比较，可以检测更早期的感染；检测标本中的支原体不必须是活体。 总之，对Mp进行实验室诊断十分必要，它是指导临床及时治疗、合理用药，防止Mp 感染流行、肺外严重并发症，以及滥用药物导致耐药菌产生的重要手段。