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本章内容 一、温度对发酵的影响及控制 二、pH对发酵过程的影响及控制 三、泡沫对发酵的影响及控制 四、CO2浓度和呼吸商 五、流加补料的控制 不同生长阶段的微生物对温度的反应不同 处于停滞期的微生物对温度的影响十分敏感。 对于对数生长期的微生物,最适范围内提高培养温度,有利于菌体生长; 处于生长后期的微生物,其生长速度一般主要取决于溶解氧,而不是温度。 二、温度对发酵代谢产物的影响 三、发酵热 生物热 (Q生物): 合成高能化合物ATP 合成产物 以热的形式散发 搅拌热(Q搅拌) 蒸发热(Q蒸发) 辐射热( Q辐射) Q发酵= Q生物+ Q搅拌- Q蒸发- Q辐射 一、泡沫的类型 一类存在于发酵液的液面上; 一类出现在粘稠的菌丝发酵液当中 二、发酵过程中泡沫的形成与变化 影响因素 通气、搅拌的强度 培养基的配比及原材料组成 培养基的灭菌方法和操作条件 三、泡沫的消除 化学消泡 机械消泡 1化学消泡 (1)化学消泡机理 化学消泡的优点 来源广泛 作用迅速可靠,消泡效率高 不需改造现有设备 容易实现自动控制 (2)消泡剂特点 必须是表面活性剂,且具有较低的表面张力,消泡作用 迅速,效率高。 对气液界面的散布系数足够大,具有一定的亲水性。 在水中的溶解度较小,以保持其持久的消泡或抑泡性能。 对发酵过程无毒,对人、畜无害,同时对菌体生长和代谢 无影响,不影响产物的提取和产品质量。 不干扰溶解氧、pH等测定仪表使用,最好不影响氧的传递。 能耐高压蒸气灭菌而不变性,对设备无腐蚀性影响 来源方便,价格便宜。 (5)消泡剂的应用和增效 A 消泡剂加载体增效 B 消泡剂并用增效 C 消泡剂乳化增效。 2 机械消泡 靠机械力引起强烈振动或者压力变化,促使泡沫破裂,或借机械力将排出气体中的液体加以分离回收。 理想的机械消泡装置: 动力小 结构简单 坚固耐用 清洗、杀菌容易 维修保养费用少 机械消泡方法 罐内消泡:耙式消泡桨、旋转圆板式、气流吸入式、冲击反射板式、碟式及超声波等机械消泡装置。 罐外消泡:旋转叶片式、喷雾式、离心式及转向板式等机械消泡装置。 二、呼吸商和发酵的关系 三、CO2浓度的控制 二氧化碳浓度的控制根据它对发酵的影响而定。 通气搅拌控制二氧化碳浓度 ; 二氧化碳的产生与补料控制有密切关系 2 补料的原则 补料的原则就在于控制微生物的中间代谢,使之向着有利于产物积累的方向发展。 为了有效地进行中间补料,必须选择恰当的反馈控制参数,以及了解这些参数与微生物代谢、菌体生长、基质利用以及产物形成之间的关系。 二、补糖的控制 一般在加糖后初始的阶段,如能维持较高浓度的还原糖含量,对生物合成有利;但高浓度还原糖含量不宜维持过久,否则会导致菌丝大量繁殖,影响产物增加。 青霉素发酵不同阶段: 菌体生长阶段:RQ=0.909 维持阶段:RQ=1 生产阶段:RQ=4 如果产物的还原性比基质大时,其RQ值就增加;反之,当产物的氧化性比基质大时,RQ值就要减少,其偏离程度决定于单位菌体利用基质形成产物的量。 第五节 流加补料的控制 1.可以解除底物抑制、产物的反馈抑制和分解代谢物阻遏作用; 2.避免因一次性投料过多造成细胞大量生长,耗氧过多而造成波谷现象; 3.可用作控制细胞质量的手段; 4.可作为理论研究的手段,为自动控制和最优化控制提供实验基础; 优点: 一、补料的内容和原则 1.补料的内容 ① 补充微生物能源和碳源 ② 补充菌体所需要的氮源 ③ 补充微量元素或无机盐 ④ 添加前体、诱导剂等 补糖时间对四环素发酵单位的影响 Ⅰ-补糖时间适当 ( 45h后加) Ⅱ-补糖时间过晚 (62h开始加) Ⅲ -补糖时间过早 (20h后加) * * 第一节 温度对发酵的影响及控制 一、温度对微生物细胞生长的影响 1 温度影响产物合成的速率及产量。 2 温度能够改变菌体代谢产物的合成方向。 3 温度对多组分次级代谢产物的组分比例产生影响。 4 温度可以通过改变发酵液的物理性质,间接影响菌的生物合成。 发酵热 :发酵过程中所产生的热量 (生物热、搅拌热、蒸发热、辐射热 ) 四、最适温度的选择 ◇ 在发酵的整个周期内仅选一个温度不一定好。 因为最适合菌生长的温度不一定适合产物的合成。 例如: 青霉素产生菌的最适生长温度是30℃,而最适于青霉素合成的温度是20℃。
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