酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA).pptVIP

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  • 2017-09-19 发布于江西
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酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA).ppt

酶联免疫吸附试验 (enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA) 一、实验目的 掌握ELISA的原理及方法 二、principle:  抗原或抗体能结合到固相载体的表面仍保持其活性;抗原或抗体与酶交联成酶标抗原或抗体后,仍分别保持其免疫活性和酶活性。 酶标抗原或抗体与相应抗体或抗原反应后,结合在免疫复合物上的酶遇到相应的底物时,可以催化底物的水解、氧化或还原,从而产生有色物质。颜色反应的深浅与相应抗体或抗原量相关。 常用的ELISA方法包括:间接法、双抗体夹心法、竞争法等。 ELISA双抗体夹心法(sandwich assay)测甲胎蛋白(α-fetal protein, AFP) 一、Principle of AFP detection 用抗AFP抗体包被固相载体,加入待检标本,标本中的AFP与固相载体上的抗体结合,再加入酶标记的抗AFP抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,加底物显色,颜色的深浅与相应AFP的量呈正相关。 principle 二、material 1、AFP检测试剂盒 2、AFP参考标准夜(0、25、50、100、200、400ng/ml)。 3、DW 4、终止液(2M H2SO4)。 5、酶标测定仪、37℃温箱。 6、微量加样器、滴管、吸水纸等。 三、method (一)quantity test 1、a

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