羊绒羊毛纤维线粒体DNA 提取方法研究.pdfVIP

第 39卷 第 11期 毛纺科技 2011年 11月 WoolTextileJourna1 — 53 ～ 羊绒羊毛纤维线粒体 DNA提取方法研究 金美菊 ，阮 勇 ，严冰冰 ，石东亮 (1．宁波市纤维检验所，浙江 宁波 315000；2．上海美吉生物医药科技有限公司，上海 201203) 摘 要 ：研究和开发动物纤维的DNA检测 ，关键的技术难点在于 DNA 的提取 。文章就羊绒羊毛纤维线粒体 DNA的提取方法进行了实验 ，并通过PCR扩增的方法进行了验证。结果表明：使用 Promega试剂盒，将纤维样品尽 量处理成粉末状，并在样品经裂解液处理后先离心除去其中尚未完全溶解的纤维，然后进行后续操作是比较有利 的，完全能够得到满足PCR扩增和 DNA测序要求的线粒体 DNA样 品。 关键词：羊绒 ；羊毛；线粒体DNA；提取方法 中图分类号 ：TS102．3I 文献标识码 ：A 文章编号 ：1003—1456(2011)l1 053—03 ExtractionmethodofmtDNA forcashmereandwoolfibers JINMei．ju ，RUANYong，YANBing—bing，SHIDong．1iang (1．NingboFiberInspectionInstitute，Ningbo315000，China； 2．ShanghaiMajorbioBio—PharmTechnologyCo．，Ltd．，Shanghai201203，China) Abstract：ExtractionmethodofmtDNA isthekeytechnicalproblem aboutresearchanddevelopment theDNA testingforanimalfiber．Thispaperstudysthe extraction methodofmtDNA forcashmereand wool，andvalidatesthroughPCR enlarge．Theresultsshow thatusethePromegakit，itisfavorableto nextstepthatmakeingthe samplepowderasmuch aspossible，and firstremovetheundissolvedfibers throughcentrifugalaftercracking，thenthesamptegained can bemettheruquirmentsforPCR enlarge andDNA sequencing． Keywords：cashmere；wool；mtDNA ；extractionmethod DNA是由4种脱氧核糖核苷酸按一定 的顺序 ， 法 ，但随着羊毛剥鳞、拉伸 、防缩等先进技术的应用 ， 以3，5一磷酸二酯键连接而成的一类核酸分子 ，是 即便是经验丰富的资深检验人员有时也难以准确辨 生物遗传信息的载体 。由于不同物种的DNA分子 别羊绒和羊毛。随着分子生物技术的飞速发展，尤 存在一定的差异，而相同物种的DNA分子则保持相 其是聚合酶链式反应 (PCR)在生物学各个领域的广 对稳定 ，因而通过分析 DNA的序列可以客观准确地 泛应用 ，越来越多的研究人员开始采用 DNA分析技 鉴定物种类型。 术来鉴别羊绒、羊毛纤维。目前 ，国外对动物纤维成 在纤维检测领域，由于羊绒羊毛纤维分子结构 分分析 ，已经从定性分析发展到 了二组分混纺纤维 相同，化学性质相 同，使得普通的燃烧法、化学溶解 的定量分析 ¨。 法失去作用。 目前常用 的方法是光学投影显微镜 研究和开发动物纤维的DNA检测，关键的技