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第三章 生物催化剂与酶工程应用 (一)生物催化的基本概念 (1)生物转化是微生物将一种化合物转化为结构上相关产物的过程。1864年,Pasteur发现醋酸杆菌(Acetobacter)可氧化乙醇成为醋酸,首次以微生物转化进行有机反应 例如: (2)生物转化与发酵的区别 发酵的含义 利用微生物,在适宜的条件下,将原料经 过特定的代谢途径转化为人类所需要的产物的 过程 发酵过程常常是有多步反应过程构成。 生物转化仅仅由一个或少数几个酶促反应组成。 生物转化的产物是微生物细胞对底物的特定部位的化学反应。 A 专一性强,具有独特、高效的底物选择性; B 环境友好,通常用水作为反应媒介(水是最绿色的溶剂); C 通常在室温和常压下进行,减少了能源的使用,降低了反应的不可控性; D 减少了保护、脱保护步骤,原子经济性好,并能完 成一些化学合成难以进行的反应。 基于绿色化学的十二条准则,生物催化成为当前国际公认最绿色的化学转化技术之一。 生物催化材料有酶、微生物菌体、动植物的组织及细胞。在手性合成中应用较多的是水解酶、氧化-还原酶以及面包酵母等微生物。 生物催化的方式有添加前体发酵法、游离酶法、静息细胞法、固定化酶法、固定化细胞法。可在水相、有机相和水-有机溶剂双相等系统中进行。 生物催化技术的应用领域 石油馏分生物脱硫 Poly(Butylene-Succinate) PBS 聚丁二酸丁二醇酯Poly(butylene succinate-co-butylene adipate) PBSA丁二酸丁二醇酯-己二酸丁二醇酯共聚物poly(butylene succinate-co-terephthalate)s PBST聚丁二酸/对苯二甲酸丁二醇酯Soft biodegradable material technology 软性生分解材料技术Photodegradable Plastics光降解性塑胶Disintegradable Plastics 崩解性塑胶Biodegradable Materials生物可分解材料Bio-Polymer生物高分子聚合物Green Plastics绿色塑胶 酯) 氨基酸是食品、药物、化妆品的重要原料, 用化学方法合成的氨基酸皆为D,L -氨基酸的消旋混合物。作为药用的氨基酸只有L 一异构体具有生理活性, 为了得到纯的异构体, 就必须对消旋的混合物进行光学拆分, 以前用化学方法拆分成本高效率低, 现在可以用固定酶的方法拆分, 将氨基酸混合通过固定化的酞化氨基酸水解酶柱式反应器, 可将混合物转化为L-异构体, 收率可达80 % L-赖氨酸是一种生物体必须的氨基酸, 目前利用固定酶, 已可以从合成的化工原料环已烷开始生产L-赖氨酸方法是:首先将环已烷转化成D.L-a 氨基-已内酞胺。将L-a 氨基-已内酞胺水解酶和a -氨基-已内酞胺消旋酶以离子键方式固定在纤维素上。将这两种固定酶同时作用于D,L-a-氨基-已内酰胺。L-a-氨基-已内酞胺水解成L -赖氨酸, 剩下的D -a -氨基-已内酸胺又消旋为D , L 一消旋体, 再水解为赖氨酸, 这种方法收率儿乎达100% (二)生物催化的产生与发展 远古时代:酒的酿造,饴糖的制作,豆类做酱 1878年,Kuhne第一次提出“酶”(Enzyme)的概念,意为“在酵母中”(in yeast); 1894年,Emil Fischer发现了酶对底物(酶作用的物质)的专一性现象,提出了“锁和钥匙”模型; 酶晶体的获得,才认识到酶是蛋白质,是由酰胺键连接的氨基酸组成; 1926年,Sumner从刀豆中得到脲酶结晶,催化尿素水解,产生CO2和NH3. 1967年,丝氨酸蛋白酶,它专门用于洗涤剂. 1992年,用于生产酶的克隆技术 1982年 Cech小组发现,四膜虫的rRNA(核糖体核糖核酸)前体能在完全没有蛋白质的情况下进行自我加工,催化得到成熟的rRNA产物。这就是说,RNA本身就是生物催化剂(生物分子也具有催化活性)。 20世纪80年代以来,基因工程技术用于酶学研究得到高度重视。应用DNA重组技术可以生产出高效能、高质量的酶产品,用定点突变法在指定位点突变,可以改变酶的催化活性与专一性。 (三)酶催化剂的应用 应用领域:化工、饲料、皮革、造纸、纺织、酿造。 酶催化剂具有手性结构,是不对称合成的最佳催化剂组分,在药物合成领域有非常广阔的应用前景。 精细化工、制药、食品等领域,正在开发 非水相介质中利用酶催化的生物催化方法 酶在有机相中进行催化反应,具有下列优点: 可进行酶水解的逆反应
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